ПОЛУЧЕНИЕ И ХАРАКТЕРИСТИКА НОВЫХ КЛЕТОЧНЫХ ЛИНИЙ САРКОМ МЯГКИХ ТКАНЕЙ И ОСТЕОГЕННЫХ САРКОМ ДЛЯ ТРАНСЛЯЦИОННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Аннотация:

Редкая встречаемость, высокая гистологическая гетерогенность, меняющиеся стандарты классификации и сложность культивирования in vitro являются причинами дефицита клеточных линий сарком мягких тканей и остеогенных сарком, необходимых для проведения крупномасштабных доклинических исследований. Получение и характеристика новых клеточных линий сарком имеют большое значение для создания клеточных моделей, позволяющих изучать процессы онкогенеза и метастазирования опухолей из тканей мезенхимного гистогенеза при разработке новых методов лечения. Цель работы: создание коллекции новых охарактеризованных клеточных линий сарком мягких тканей и остеогенных сарком, пригодных для трансляционных исследований. В исследовании использовали образцы опухолей 71 пациента НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова с диагнозом «саркома», полученных интраоперационно за период 2013-2020 гг. Для культивирования клеток сарком был разработан стандартный протокол. Была изучена пролиферативная, инвазивная и миграционная активность полученных клеточных линий в монослое и сфероидах, проведены HLA типирование, оценка экспрессии раково-тестикулярных генов и маркеров стволовых клеток CD133 и ALDH1. Создана коллекция клеточных линий сарком, включающая 54 постоянные клеточные линии 18 гистологических подтипов: 39 культур сарком мягких тканей и 15 культур остеогенных сарком, культуры метастатического происхождения составили 81,5% (п=44). В процессе длительного культивирования увеличилась пролиферативная активность клеток сарком (р<0,05]. Выявлены статистически значимые различия по параметрам миграционной активности между культурами мягкотканных и остеогенных сарком [р<0,05]. Обнаружена высокая степень гетерогенности транскрипционной активности изучаемых раково-тестикулярных генов, отсутствие экспрессии выявлено в 19,2% случаев. С наибольшей частотой детектировали активность генов PRAME (55,8%) и GAGE7 (50%), была обнаружена коэкспрессия этих генов (rho=0,5025; р=0,00015). Экспрессия PASD1 коррелировала с GAGE1 (rho=0,6951; р=0,00001), PRAME (rho=0,5743; р=0,00001). Также была выявлена коэкспрессия генов NY-ESO-1 и MAGE А1 (rho=0,4027; р=0,00308). Установлена обратная корреляция средней силы между количеством ALDH1+-клеток и CD133+-клеток в культурах и значением времени до прогрессирования заболевания у пациентов (rho=-0,505, р=0,033; rho=-0,513, р=0,021, соответственно). Полученные и охарактеризованные клеточные линии могут стать важным компонентом для реализации перспективных трансляционных исследований, востребованным инструментом для решения разнообразных задач современной медицины, таких как протеомные исследования, выявление важных сигнальных механизмов, поиск таргетных молекул для создания новых терапевтических подходов.

Авторы:

Издание: Гены @ Клетки
Год издания: 2020
Объем: 16с.
Дополнительная информация: 2020.-N 3.-С.92-107. Библ. 43 назв.
Просмотров: 16