ОПТИМИЗАЦИЯ БИОСИНТЕЗА (S)-3-ГИДРОКСИМАСЛЯНОЙ КИСЛОТЫ ИЗ ГЛЮКОЗЫ ПО ОБРАЩЕННОМУ ПУТИ В-ОКИСЛЕНИЯ ЖИРНЫХ КИСЛОТ РЕКОМБИНАТНЫМИ ШТАММАМИ Escherichia coli

Аннотация:

Исследован микроаэробный синтез 3-гидроксимасляной кислоты штаммом Escherichia coli ВОХ3.1 А4 РL-atoB PL-fes5 (MG1655 lacfi, AackA-pta, ApoxB, AldhA, AadhE, AfadE, PL-SDphiW-atoB, phiW-fadB, P-SDphi10-tesB), ранее направленно сконструированным для биосинтеза целевого соединения из глюкозы по обращенному пути В-окисления жирных кислот. Достигнут выход целевого продукта 0.12 моль/моль. Инактивация в штамме гена неспецифичной тиоэстеразы YciA приводила к росту выхода 3-гидроксимасляной кислоты до 0.15 моль/моль. Для оптимизации биосинтеза продукта был сконструирован штамм MGA4 РL-tesB (MG1655 AackA-pta, АрохВ, AldhA, AadhE, PL-SDphi10-tesB), в котором была дополнительно обеспечена экспрессия генов, кодирующих ключевые ферменты В-окисления жирных кислот в составе плазмиды pMW118m-atoB-fadB. Уровень микроаэробного синтеза 3-гидроксимасляной кислоты из глюкозы штаммом MGA4 РL-tesB (pMW118m-atoB-fadB) в тестовых условиях достигал 0.35 моль/моль. Инактивация в штамме гена неспецифичной тиоэстеразы YciA приводила к незначительному снижению побочной продукции ацетата. Последующая инактивация в штамме гена неспецифичной тиоэстеразы Ydil практически не влияла на уровень синтеза побочных продуктов. Контролируемые условия культивирования сконструированного штамм MGA4 PL-tesB AyciA (pMW118m-atoB-fadB) в биореакторе позволили достичь выхода 3-гидроксимасляной кислоты из глюкозы, составляющего 0.75 моль/моль.

Авторы:

Издание: Прикладная биохимия и микробиология
Год издания: 2021
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2021.-N 2.-С.117-126. Библ. 25 назв.
Просмотров: 30