НОВЫЙ МЕТОД ИЗОЛЯЦИИ ПЕРВИЧНОЙ КУЛЬТУРЫ КАНАЛЬЦЕВЫХ ЭПИТЕЛИОЦИТОВ ПОЧЕК МЫШИ

Аннотация:

Для фундаментального изучения этиологии почечных болезней мы разработали улучшенные методы выделения первичных культур эпителиоцитов гломерул и почечных канальцев почек мышей. Начальным этапом выделения этих клеток была перфузия почек in vivo раствором ФСБ с коллагеназой. Для этого накладывали лигатуры на верхнюю брыжеечную и подвздошную артерии, а также на грудной отдел аорты, после чего почки перфузировали через абдоминальный отдел аорты. Затем клетки выделяли из почек ex vivo, оценивали их количество, целостность и жизнеспособность. Разработанный простой и экономически эффективный метод отличается высоким выходом очищенной фракции неповреждённых канальцевых эпителиоцитов необходимых для исследования почек молекулярно-биологическими методами. Болезни почек разделяют на хронические и острые, причём обе формы связаны с поражением их канальцевых эпителиоцитов (КЭЦ). Почечные канальцы разделяют на три вида в соответствии с их морфологией, расположением и функциональной ролью: проксимальные извитые канальцы, петля Генле и дистальные извитые канальцы. Эпителиоциты проксимальных канальцев представляют собой клетки кубической формы, расположенные в корковом веществе почки. Диаметр и длина проксимальных канальцев составляют около 60 мкм и 16-24 мм соответственно. Дистальные извитые канальцы также расположены в корковом веществе. Они имеют похожую форму с проксимальными канальцами, при этом их диаметр составляет 20-50 мкм, а длина несколько меньше по сравнению с таковой у проксимальных канальцев. Петля Генле расположена главным образом в мозговом веществе почки. Диаметр этой структуры составляет 14-22 мкм. В настоящее время выделение КЭЦ и их культуральная экспансия представляют собой важные, даже критические методические этапы в изучении механизмов поражения почек. В связи с этим и на основе наших предыдущих работ, цель данного исследования — разработать более совершенный метод выделения КЭЦ почек мышей для получения первичной культуры этих клеток.

Авторы:

Издание: Бюллетень экспериментальной биологии и медицины
Год издания: 2021
Объем: 5с.
Дополнительная информация: 2021.-N 5.-С.656-660. Библ. 7 назв.
Просмотров: 22