ВЫЯВЛЕНИЕ "БОКОВОЙ ПОПУЛЯЦИИ", АССОЦИИРОВАННОЙ С АКТИВНОСТЬЮ АТР-ЗАВИСИМЫХ ТРАНСПОРТЕРОВ, ПРИ ПОМОЩИ ПРОТОЧНОЙ ЦИТОМЕТРИИ С ВИЗУАЛИЗАЦИЕЙ

Аннотация:

На клеточных линиях колоректальной аденокарциномы человека SW480, НТ-29, Сасо-2 проанализирована эксклюзия витального красителя DyeCycle Violet, обусловленная активностью АТР-зависимых транспортеров. При сходстве цитометрических данных, полученных с помощью проточного цитометра FACSAria III и проточного цитометра с микроскопией высокого разрешения ImageStreamX Mk II, применение проточной цитометрии с функцией визуализации позволило охарактеризовать морфологию клеток "боковой популяции", а также других популяций клеток, отличающихся по степени накопления красителя. Особый интерес вызывает популяция клеток более мелких, чем клетки "боковой популяции", которые практически не окрашиваются красителем. Не исключено, что эта популяция может вносить свой вклад в устойчивость опухоли к химиотерапии. Анализ эксклюзии витальных красителей является способом оценки устойчивости раковых клеток к химиопрепаратам. Данное свойство обусловлено гликопротеинами, ответственными за активный энергозависимый транспорт веществ через мембраны клеток. Эти гликопротеины объединены в суперсемейство АТР-связывающих кассетных белков, из них около 50 белков-транспортеров представлены в клетках человека. Энергозависимые клеточные помпы предпочтительно транспортируют липофильные катионные молекулы, причём один транспортер может действовать на структурно различные субстраты. Применение метода проточной цитометрии для подобных исследований позволило выявить особую популяцию раковых клеток, которая обладает повышенной способностью к откачиванию чужеродных веществ. Впервые данная методика была реализована с применением флуоресцентного ДНК-связывающего красителя Hoechst 33342, возбуждаемого ультрафиолетовым лазером. Для Hoechst 33342 характерна флуоресценция в синем диапазоне (Hoechst-blue), в то же время при связывании с ДНК он излучает также и в красном диапазоне (Hoechst-red).

Авторы:

Издание: Биомедицинская химия
Год издания: 2021
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2021.-N 2.-С.137-143. Библ. 18 назв.
Просмотров: 28