РАЗРАБОТКА МЕТОДА ПРЯМОГО КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ LAСТОВACILLUS SPP. В СОДЕРЖИМОМ КИШЕЧНИКА НА ОСНОВЕ ПЦР В РЕАЛЬНОМ ВРЕМЕНИ

Аннотация:

Микрофлора кишечника, выполняя множество разнообразных функций в организме хозяина, играет незаменимую роль в поддержании здоровья. С появлением новых данных о генетическом разнообразии микроорганизмов, населяющих ЖКТ, резко возросло число работ по качественным и количественным характеристикам кишечного микробиома в целом, его групп, родов и даже видов. В частности, повысился интерес к изучени ю бактерий рода Lactobacillus и их участию в поддержании гомеостаза. В связи с этим стала актуальной разработка некультуральных методов анализа представителей кишечной флоры, поскольку традиционные методы, основанные на бакпосеве, являются многоэтапными, зачастую недостаточно специфичны, низкоэффективны для анаэробных и микроаэрофильных микроорганизмов и, что немаловажно, требуют незамедлительной обработки биоматериала после его получения. Поскольку отдельные виды лактобацилл в составе изобильного микробного пула могут присутствовать в низких концентрациях, на первом этапе для оценки физиологической роли популяции важно получить представление о наиболее характерных для данного рода видовых представителях у человека и разработать адекватные методы их прямого выявления и подсчёта. Одной из наиболее доступных и перспективных технологий для этих целей, позволяющей с высокой специфичностью определять микроорганизмы на уровне групп, родов и видов в качественном и в количественном формате, является ПЦР в реальном времени (ГПДР-РВ). В то же время для прямого определения лактобацилл методом ПЦР-РВ необходима адаптация способов пробоподготовки кала, экстракции ДНК, а также подбор праймеров и подходящего формата ПЦР, самостоятельной калибровки для осуществления количественного подсчёта. Целью данной работы являлась разработка доступного метода прямого количественного определения бактерий рода Lactobacillus в кале методом ПЦР-РВ.

Авторы:

Издание: Бюллетень экспериментальной биологии и медицины
Год издания: 2021
Объем: 5с.
Дополнительная информация: 2021.-N 6.-С.788-792. Библ. 9 назв.
Просмотров: 21