Анализ фенотипической гетерогенности СD123-позитивных клеток при болезни Кикучи—Фуджимото с помощью метода последовательного иммунопероксидазного окрашивания и стирания

Аннотация:

Болезнь Кикучи—Фуджимото (БКФ) — редкое заболевание, которое клинически проявляется преимущественно лихорадкой и лимфаденопатией. Первоначально предполагалось, что БКФ встречается в основном у женщин в Восточной Азии, впоследствии это заболевание было описано во всех этнических группах по всему миру. Важным дифференциально-диагностическим признаком БКФ считается обнаружение в ткани пораженного лимфатического узла плазмоцитоидных дендритных клеток (ПАК), которые экспрессируют CD123. Стандартный иммуногистохимический метод окрашивания обладает достаточной чувствительностью и специфичностью для выявления CD123, но не позволяет судить о возможной фенотипической гетерогенности клеток с экспрессией CD123. Цель исследования. Выявить фенотипическую гетерогенность клеток, экспрессирующих CD123, в пораженных лимфатических узлах у пациентов с БКФ методом последовательного иммунопероксидазного окрашивания и стирания (SIMPLE). Материал и методы. Исследованы эксцизионные биопсии лимфатического узла у 3 пациентов с БКФ. После выполнения иммуногистохимической реакции с одним антителом гистологический препарат переводили в цифровой формат с помощью сканера Pannoramic 250 Flash III (3DHISTECH, Венгрия), далее со среза снимали покровное стекло, гидратировали и помещали в специализированный буфер. Затем на промытый гистологический препарат наносили следующее первичное антитело и выполняли дальнейшую иммуногистохимическую реакцию и сканирование. В результате каждый гистологический препарат последовательно был окрашен в реакциях с 4 антителами. На микрофотографиях препаратов, окрашенных в реакции с CD123-антителом, отмечали позитивные клетки для их идентификации в программе Pannoramic Viewer («3DHISTECH», Венгрия) на остальных микрофотографиях, демонстрирующих экспрессию других 3 маркеров. Выбранные поля зрения экспортировали в JPG-формат. Результаты. На основе оценки коэкспрессии антигенов CD123, MNDA, CD68, TCL1A были обнаружены 4 субпопуляции CD123+-клеток: №1: CD68+/MNDA+/TCL1А+; №2: CD68+/ MNDA+/TCL1А-; №3: CD68+/MNDA-/TCL1А+; №4: CD68-/ MNDA-/TCL1A+. Заключение. Метод последовательного иммунопероксидазного окрашивания и стирания показал фенотипическую гетерогенность CD123-позитивных клеток (часть из них, вероятно, ПДК) и позволил выделить 4 иммунофенотипически различные субпопуляции в пораженных лимфатических узлах у пациентов с БКФ. Необходимы дальнейшие исследования для определения роли субпопуляций в патогенезе БКФ и других заболеваний.

Авторы:

Издание: Архив патологии
Год издания: 2021
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2021.-N 4.-С.36-44. Библ. 31 назв.
Просмотров: 24