Накопление нейтральных липидов и бета-каротина дрожжами Yarrowia lipolytica на среде с сахарозой в качестве источника углерода

Аннотация:

Сконструированы рекомбинантные дрожжи Yarrowia lipolytica, в которых на фоне усиления пути синтеза нейтральных липидов были экспрессированы гены ScSUC2 Saccharomyces cerevisiae и YIHXK1 Y. lipolytica, кодирующие соответственно ферменты инвертазу и гексокиназу, что позволяет эффективно утилизировать сахарозу в качестве единственного источника углерода. При культивировании в пробирках в минимальной среде с лимитом по азоту и высоким содержанием сахарозы сконструированный штамм накапливал нейтральные липиды в количестве 50,7% от сухого веса биомассы. Следующим этапом метаболической инженерии было использование системы редактирования генома CRISPR-Cas9 для введения гетерологичного пути синтеза бета-каротина посредством экспрессии генов CarRP и CarB Mucor circinelloides, кодирующих бифункциональный фермент фитоенсинтазу/ликопин-бета-циклазу (carRP) и фитоендегидрогеназу (саrВ), а также повышения уровня экспрессии гена YIGGS1 Y. lipolytica, кодирующего фермент геранилгеранилдифосфат синтазу. Впервые продемонстрирована продукция бета-каротина на среде с сахарозой, которая составила 24,0 мг/г сухого веса биомассы и 406,9 мг/л на 5 сутки культивирования в пробирках в богатой среде с порционной подачей 50 г/л сахарозы, а также 21,9 мг/г сухого веса и 625,8 мг/л в богатой среде с концентрацией сахарозы 90 г/л.

Авторы:

Издание: Биотехнология
Год издания: 2021
Объем: 13с.
Дополнительная информация: 2021.-N 3.-С.29-41. Библ. 33 назв.
Просмотров: 23