ПОЛУЧЕНИЕ И СВОЙСТВА РЕКОМБИНАНТНОГО ПРОТЕОЛИТИЧЕСКИ АКТИВНОГО ГОМОЛОГА СЕРИНОВОЙ ПЕПТИДАЗЫ SerPH122 Tenebrio molitor

Аннотация:

Псевдоферменты — гомологи активных ферментов, имеют аминокислотные замены в активном центре и в связи с этим обычно не обладают ферментативной активностью. В данной работе получен рекомбинантный пробелок (proSerPH122) гомолога сериновых пептидаз семейства S1 мучного хрущака (Tenebrio molitor) в штамме-продуценте дрожжей Komagataella kurtzmanii. В процессе секреции в дрожжах целевой белок, содержащий His6-tag, продуцировался в гликозилированной форме. Изучение свойств проводили параллельно для гликозилированной и дёгликозилированной форм. Для изучения энзиматических свойств полученный в виде пробелка гомолог proSerPH122 с заменой Ser активного центра на Thr процессировали предварительно трипсином. Показано, что процесси-рованный зрелый гомолог SerPH122 обладал невысокой, но достоверно детектируемой активностью по хромогенному субстрату Sue-Ala-Ala-Pro-Phe-pNA, и эта активность не зависела от уровня его гликозилирования.

Авторы:

Издание: Прикладная биохимия и микробиология
Год издания: 2021
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2021.-N 5.-С.450-457. Библ. 23 назв.
Просмотров: 18