МЕТОДИКА ОЦЕНКИ УРОВНЯ ЦИРКУЛИРУЮЩЕЙ В КРОВИ МИТОХОНДРИАЛЬНОЙ ДНК ПО ГЕНАМ ND1 И ND2

Аннотация:

Существует ряд проблем, ограничивающих возможности оценки уровня митохондриальной ДНК (мтДНК) в крови, такие как высокая вариабельность митохондриальных генов, делении отдельных участков митохондриального генома при ряде патологических состояний, разные источники мтДНК, циркулирующей в кровяном русле (мтДНК из тканей, из клеток крови т.д.). Мы разработали дизайн праймеров и TaqMan зондов для высококонсервативных участков генов ND1 и ND2, находящихся вне "горячих зон" митохондриальных делеций. Для стандартизации методики истинную концентрацию низкомолекулярной мтДНК определяли методом ПЦР в реальном времени для двух мишеней: фрагмента гена ND2 (122 п.н.) и генов ND1 и ND2 (1198 п.н.). Чувствительность и специфичность разработанного подхода проверена на ДНК, выделенной из плазмы крови здоровых доноров разных национальностей. Проведено динамическое наблюдение за концентрацией низкомолекулярной мтДНК в плазме крови двух больных COVID-19 в течение 2 нед стационарного лечения. Показано значимое увеличение содержания низкомолекулярной мтДНК в первые 5 сут нахождения в стационаре с последующим снижением до уровня здоровых доноров. Наша методика позволяет оценить уровень низкомолекулярной мтДНК в крови независимо от качества взятия образца и позволяет стандартизовать этот биологический маркер как при инфекционной, так и неинфекционной патологии.

Авторы:

Издание: Бюллетень экспериментальной биологии и медицины
Год издания: 2021
Объем: 4с.
Дополнительная информация: 2021.-N 10.-С.515-518. Библ. 9 назв.
Просмотров: 11