Разработка платформы для получения рекомбинантных белков — компонентов эпитопных вакцин для профилактики COVID-19

Аннотация:

Нами разработана новая платформа для создания антикоронавирусных эпитопных вакцин. Из рецептор-связывающего мотива Spike-белка вируса SARS-CoV-2 были выбраны два петлеобразных эпитопа длиной 22 и 42 аминокислотных остатка, реализующих большое количество белок-белковых взаимодействий в комплексах с АСЕ2 (ангиотензинпревращающий фермент 2) и нейтрализующими антителами. Нами проведено конструирование двух типов гибридных белков, включающих один из двух выбранных эпитопов. Для фиксации конформации выбранных эпитопов применялся подход с использованием белковых каркасов. В качестве эпитопного каркаса для сближения С- и /V-концон петлеобразных эпитопов использован гомолог белка Rop из плазмиды Escherichia coli ColEl, в структуре которого присутствует мотив «спираль—поворот—спираль». Петлеобразные эпитопы встраивали в область поворота; конформация дополнительно фиксировалась дисульфидной связью, образующейся между остатками цистеинов, присутствующих в составе эпитопов. С целью мультимеризации к эпитопам, встроенным в Rop-подобный белок, присоединяли либо альдолазу из Thermotoga maritima, формирующую в растворе тример, либо а-спиральный тримеризатор Spike-белка SARS-CoV-2. Для обеспечения возможности очистки на гепарин-содержащих сорбентах на С-конец гибридных белков ввели короткий фрагмент из гепарин-связывающего гемагглюти-нина Mycobacterium tuberculosis. Все полученные белки демонстрировали высокий уровень иммуногеннос-ти после трехкратного парентерального введения мышам. Сыворотки мышей, иммунизированных обоими гибридными белками на основе альдолазы, а также белком на основе тримеризатора Spike-белка SARS-CoV-2, несущим более длинный эпитоп, в высоком титре взаимодействовали как с инактивирован-ным вирусом SARS-CoV-2, так и с рецептор-связывающим доменом Spike-белка. Представленная разработка в перспективе может быть использована для создания новых эпитопных вакцин для профилактики вирусных инфекций.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2021
Объем: 15с.
Дополнительная информация: 2021.-N 10.-С.1449-1463. Библ. 23 назв.
Просмотров: 22