ЭКСПРЕССИИ МИКРОРНК В ПЛАЗМЕ КРОВИ, ОТТЕКАЮЩЕЙ ОТ ГИПОФИЗА, У ПАЦИЕНТОВ С БОЛЕЗНЬЮ ИЦЕНКО-КУШИНГА И АКТГ-ЭКТОПИРОВАННЫМ СИНДРОМОМ

Аннотация:

За последние десятилетия микроРНК зарекомендовали себя как новые маркеры для целого ряда заболеваний. Определение специфичной панели микроРНК, отличающей пациентов с болезнью Иценко-Кушинга (БИК) и АКТГ-эктопированным синдромом (АКТГ-ЭС; АКТГ — адренокортикотропный гормон), смогло бы значительно упростить диагностику. ЦЕЛЬ. Выявить циркулирующие микроРНК, отличающиеся у пациентов с БИК и АКТГ-ЭС в плазме крови, оттекающей от гипофиза. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Выполнено одноцентровое одномоментное выборочное исследование случай-контроль. Включены 24 пациента с АКТГ-зависимым эндогенным гиперкортицизмом (ЭГ), которым требовалось проведение селективного забора крови из нижних каменистых синусов (ИКС). Из них 12 пациентов с БИК (м=2,ж=10), возрастная медиана 46,5 [33,8; 53,5] года, и 12 пациентов с АКТГ-ЭС (м=4, ж=8), возрастная медиана 54 [38,75; 60,75] года. Образцы плазмы крови из НКС были получены до введения стимуляционного агента, центрифугированы и заморожены при температуре -80°С. Выделение микроРНК из плазмы крови проводили с помощью miRNeasy Serum/Plasma Kit (Qiagen, Германия) согласно инструкции компании-производителя на автоматической станции QIAcube (Qiagen, Германия). Концентрацию суммарной РНК в водном растворе оценивали на спектрофотометре NanoVue Plus (GE Healthcare, США). Библиотеки были подготовлены с помощью QIAseq miRNA Library Kit согласно стандартным протоколам производителя. Экспрессию микроРНК исследовали с помощью секвенирования на lllumina NextSeq 500 (lllumina NextSeq 500, США). РЕЗУЛЬТАТЫ. Обнаружены 108 дифференциально экспрессирующихся микроРНК (р<0,05) после поправки на множественность сравнений. МикроРНК разделены на три группы — группа 1 с числом прочтений более 10 в обеих группах сравнения, группа 2 — с числом прочтений менее 10 в одной из групп, группа 3 — с числом прочтений менее 10 в обеих группах. Для верификации методом количественной полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (RT-qPCR) планируется использовать следующие микроРНК: miR-383-3p, miR-4290 и miR-6717-5p, экспрессия которых была повышена у пациентов с БИК по сравнению с пациентами из группы АКТГ-ЭС в 46,36 (р=0,01), 6,84 (р=0,036) и в 4,49 раза (р=0,031) соответственно, miR-1203, miR-1229-Зр, miR-639, экспрессия которых была снижена у пациентов с БИК в 36,74 (р=0,013), 78,3 (р—0,003), 73,22 раза (р=0,002) соответственно, а также miR-302c-3p, экспрессия которой была повышена у пациентов с БИК в 92,69 раза (р=0,001). ЗАКЛЮЧЕНИЕ. В ходе исследования был значительно расширен список микроРНК-кандидатов для диагностики АКТГ-зависимых форм ЭГ. Необходима валидизация полученных микроРНК в периферической крови на расширенной выборке пациентов методом RT-qPCR.

Авторы:

Издание: Проблемы эндокринологии
Год издания: 2021
Объем: 13с.
Дополнительная информация: 2021.-N 6.-С.18-30. Библ. 55 назв.
Просмотров: 17