ГИБРИДНЫЕ БЕЛКИ С КОРОТКИМИ КОНФОРМАЦИОННЫМИ ЭПИТОПАМИ РЕЦЕПТОР-СВЯЗЫВАЮЩЕГО ДОМЕНА Spike-БЕЛКА ВИРУСА SARS-CoV-2 СПОСОБСТВУЮТ ВЫРАБОТКЕ ВИРУСНЕЙТРАЛИЗУЮЩИХ АНТИТЕЛ ПРИ ИММУНИЗАЦИИ

Аннотация:

На основе предложенного ранее подхода синтезом в клетках Escherichia coli получены гибридные рекомбинантные белки — потенциальные компоненты эпитопных вакцин, содержащие короткие конформационные эпитопы рецептор-связывающего домена Spike-белка вируса SARS-CoV-2 (144—153, 337—346, 414—425, 496—507 а.о.), реализующие большое количество белок-белковых взаимодействий в комплексах с нейтрализующими антителами и АСЕ2 (ангиотензин-превращающий фермент 2). Полученными белками трёхкратно с интервалом в 2 недели иммунизировали мышей и исследовали иммуногенность белковых антигенов и способность сывороток взаимодействовать с инактивированным вирусом SARS-CoV-2 и с рецептор-связывающим доменом (RBD) Spike-белка, полученным в эукариотическом продуценте. Все рекомбинантные белки демонстрировали высокую иммуногенность. Наиболее высокий титр при связывании с RBD Spikeбелка продемонстрировала сыворотка, полученная при иммунизации белком на основе эпитопа 414—425. При этом титры сывороток при связывании с инактивированным вирусом и RBD в случае остальных белков оказались существенно ниже титров для полученных ранее четырёх белков на основе петлеобразных эпитопов 452—494 и 470—491, конформация которых дополнительно фиксировалась дисульфидной связью. Для всех белков — полученных ранее и в данной работе — проведено исследование активации клеточного иммунитета, детектируемой по уровню синтеза цитокинов спленоцитами иммунизированных мышей. Максимально выраженный уровень повышения синтеза цитокинов наблюдался в случае ответа на белки, включающие эпитопы с дисульфидными связями (452—494, 470—491), а также эпитопы 414—425 и 496—507. После оптимизации адъюванта для некоторых рекомбинантных белков с короткими конформационными эпитопами RBD Spike-белка были получены сыворотки мышей, демонстрирующие вируснейтрализующий эффект в реакции микронейтрализации с живым вирусом SARS-CoV-2 (hCoV-19/Russia/StPetersburg-3524/ 2020 EPI1SL 415710 GISA1D). Полученные результаты могут быть использованы для разработки эпитопных вакцин для профилактики COVID-19 и других вирусных инфекций.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2022
Объем: 14с.
Дополнительная информация: 2022.-N 3.-С.307-320. Библ. 21 назв.
Просмотров: 17