ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ БАКТЕРИАЛЬНОГО ЛИПОПОЛИСАХАРИДА НА УРОВНИ ТРАНСКРИПЦИИ ГЕНОВ ТРАНСПОРТЕРОВ СЕМЕЙСТВА SLC В МИКРОГЛИИ IN VITRO

Аннотация:

Нейродегенеративные заболевания мозга сопровождаются процессами воспаления и эксайтотоксичностью, в которых важную роль играют микроглия и астроциты. Однако сегодня нет ясной картины, отображающей точные механизмы взаимодействия и влияния глиальных клеток друг на друга в процессах, связанных с воспалительными реакциями в мозге. Цель исследования заключалась в определении влияния бактериального липополисахарида (ЛПС) как индуктора воспалительных реакций на уровни транскрипции генов транспортеров семейства Slc в микроглии in vitro в зависимости от астроцитарного окружения, а также в выявлении региональных различий в уровнях транскрипции этих генов в зависимости от региона мозга, из которого была извлечена микроглия. Исследование проводилось на клетках микроглии в условиях монокультивирования и кокультивирования с астроцитами. Микроглия и астроциты были выделены из коры и гиппокампа 21-дневных крыс популяции Вистар. Активацию микроглии вызывали с помощью ЛПС. Анализ уровней транскрипции генов, кодирующих транспортеры семейства Sic, проводили методом обратной транскрипции с последующей полимеразной цепной реакции — ОТ-ПЦР. Показано повышение ЛПС-индуцированньгх уровней транскрипции генов транспортера возбуждающих аминокислот 3 (Slclal, ЕААТЗ), транспортера возбуждающих аминокислот 4 (Slcla6, ЕААТ4), транспортера везикулярного глутамата 1 (Slcl7a7, VGLUT1) и транспортера монокарбоксилата 1 (Slcl6al, МСТ1) в клетках микроглии in vitro как при монокультивировании, так и в присутствии астроцитов. В культурах клеток микроглии в ответ на добавление ЛПС уровни транскрипции генов транспортеров семейства Sic значимо повышались на 33.5—63.3%, в культуре, кокультивированной с астроцитами — на 30.8—172.3%, а в культуре, кокультивированной с астроцитами в ответ на ЛПС — на 17.8—76.0% по сравнению с неактивированными (контрольными) культурами. Более того, были продемонстрированы региональные отличия в уровнях транскрипции исследованных генов транспортеров в ответ на введение ЛПС. Таким образом, было подтверждено изменение профиля транскрипции глутаматных и монокарбоксилатных транспортеров при активации микроглии, вызванной ЛПС, а также участие астроцитарного окружения в изменении уровней транскрипции генов этих транспортеров в микроглии. В ходе данного исследования было показано, что в ответ на действие провоспалительного фактора (ЛПС) в клетках микроглии активируется транскрипция генов семейства Slc.

Авторы:

Издание: Российский физиологический журнал
Год издания: 2022
Объем: 18с.
Дополнительная информация: 2022.-N 3.-С.379-396. Библ. 66 назв.
Просмотров: 14