Получение и характеристика крысиных моноклональных антител против антигена PAL Legionella spp.

Аннотация:

Цель работы. Получение моноклональных антител против рекомбинантного белка PAL Legionella spp., характеризующихся родоспецифичностью, что впоследствии позволит использовать их в качестве основы для разработки новых экспресс-тестов для выявления патогенных легионелл. Материал и методы. Для создания гетерогибридом крыса-мышь, продуцирующих антитела к PAL, использовали короткий трехнедельный протокол иммунизации крыс линии Wistar. В качестве партнера для слияния выступала мышиная миеломная линия клеток Sp2/0-Ag14. Гибридизацию осуществляли двумя методами: с использованием PEG-опосредованного слияния и посредством электрослияния. Последующий скрининг осуществляли методом непрямого твердофазного ИФА по отношению к белку-мишени rPAL. Анализ специфичности проводили методом дот-блот-анализа на панели лизатов 39 штаммов чистых культур, в которую были включены в том числе близкородственные и гетерологичные микроорганизмы. Результаты. Разницы в эффективности получения стабильных клонов гибридом двумя обозначенными методами клеточного слияния выявлено не было. По итогам скрининга было получено 12 клонов-продуцентов специфических крысиных моноклональных антител. Заключение. Полученные крысиные моноклональные антитела обладают высокой специфической активностью в отношении PAL L. pneumophila различных серогрупп и иных патогенных легионелл и являются достойными кандидатами для использования их в качестве компонента для создания диагностических тест-систем, выявляющих патогенных представителей рода Legionella.

Авторы:

Издание: Молекулярная генетика ,микробиология и вирусология
Год издания: 2022
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2022.-N 2.-С.14-20. Библ. 16 назв.
Просмотров: 20