МЕТОДИКА РАДИОЛИГАНДНОГО АНАЛИЗА ДЛЯ ОДНОВРЕМЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ бета1- И бета2-АДРЕНОРЕЦЕПТОРОВ В КЛЕТКАХ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА

Аннотация:

Разработана методика одновременного раздельного определения бета1- и бета2-адренорецепторов на основе радиолигандного анализа с использованием 125I-иодоцианопиндолола, включающая проведение трех измерений: 1) без лигандов-конкурентов; 2) в присутствии селективного лиганда ICI 118,551 (0.25 мкМ); 3) в присутствии двух селективных лигандов - ICI 118,551 и CGP 20712 (по 0.25 мкМ каждого). Методика протестирована на модельной системе из двух трансгенных линий клеток ADL-7A и A2R9 с экспрессией рекомбинантных бета1- и бета2-адренорецепторов. При соотношении количества бета1-адренорецепторов к бета2-адренорецепторам 1 : 10 погрешность измерения составляет-15%. Анализ девяти клеточных линий, представляющих различные типы клеток крови, показал наличие бета2-адренорецепторов в клетках Daudi, Raji, Dami, К-562, HL-60, U-937hTHP-1 и их отсутствие в Т-лимфоцитарных клетках Jurkat и MOLT-4. бета1-Адренорецепторы достоверно зарегистрированы лишь в клетках ТНР-1 моноцитарного происхождения. В остальных клетках, за исключением линии Dami, их количество оказалось ниже порога детекции, оцениваемого на уровне 200 молекул на клетку. Измерения, выполненные на мононуклеарных клетках периферической крови семи здоровых доноров, продемонстрировали присутствие бета2-адренорецепторов в диапазоне 1000—2500 молекул на клетку, тогда как содержание бета2-адренорецепторов во всех случаях находилось на грани или за гранью порога детекции.

Авторы:

Издание: Биоорганическая химия
Год издания: 2022
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2022.-N 5.-С.551-560. Библ. 22 назв.
Просмотров: 15