ПОЛУЧЕНИЕ И СВОЙСТВА РЕКОМБИНАНТНЫХ ФОРМ КСИЛОГЛЮКАНАЗЫ 74-ГО СЕМЕЙСТВА ГЛИКОЗИДГИДРОЛАЗ ИЗ ГРИБА TRICHODERMA REESEI

Аннотация:

Проведены клонирование и экспрессия полноразмерной эндо-процессивной ксилоглюканазы из гриба Trichoderma reesei (TrXeg74A), а также каталитического домена фермента (TrXeg74A-CD) в реципиентном штамме Penicillium verruculosum В1-537, являющимся высокоэффективным продуцентом целлюлаз. Уровень секреции белка после культивирования полученных рекомбинантных штаммов в лабораторном ферментере составил 35.4 и 31.4 г/л, при этом секреция TrXeg74A составила не менее 30% от общего количества белка, тогда как TrXeg74A-CD экспрессировался в гораздо меньшей степени. После выделения и очистки обеих форм рекомбинантного фермента были изучены их свойства. TrXeg74A и TrXeg74A-CD характеризовались сходной степенью процессивности при действии на ксилоглюкан из тамаринда, близкими по значению константами Михаэлиса (0.35—0.38 г/л), сходными с таковой для нативного фермента (0.30 г/л), в то же время каталитическая константа для TrXeg74A-CD была примерно в полтора раза выше соответствующего параметра для полноразмерной ксилоглюканазы. Полученные новые рекомбинантные штаммы P. verruculosum могут быть полезными при создании композиционных ферментных препаратов для эффективного гидролиза возобновляемого лигноцеллюлозного сырья.

Авторы:

Издание: Биотехнология
Год издания: 2022
Объем: 11с.
Дополнительная информация: 2022.-N 2.-С.3-13. Библ. 27 назв.
Просмотров: 16