ДЕЛЕЦИОННЫЕ ВАРИАНТЫ АУТОТРАНСПОРТЕРА Psychrobacter cryohalolentis ПОВЫШАЮТ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ЭКСПОНИРОВАНИЯ 10FN3 НА ПОВЕРХНОСТИ КЛЕТОК Escherichia coli

Аннотация:

Аутотранспортер АТ877 Psychrobacter cryohalolentis относится к семейству белков внешней мембраны, содержащих N-концевой пассажирский и С-концевой транслокаторный домены и составляющих основу для конструирования систем дисплея на поверхности клеток бактерий. Ранее мы показали, что пассажирский домен АТ877 может быть заменен холодоактивной эстеразой EstPc или 10-м доменом фибронектина III-го типа (10Fn3). С целью повышения эффективности поверхностного дисплея l0Fn3 в клетках Escherichia coli получены 4 делеционных варианта гибридного аутотранспортера Fn877. Установлено, что все варианты обнаруживаются в мембране бактериальных клеток и обеспечивают связывание специфических к 10Fn3 антител на поверхности клетки. Наиболее высокий уровень связывания обеспечивают варианты лямбда239 и лямбда310, содержащие 4 и 7 бета-тяжей из 12, составляющих структуру транслокаторного домена. С помощью электрофореза в полунативных условиях продемонстрировано наличие тепловой модифицируемости полноразмерного Fn877 и его делеционных вариантов, что указывает на сохранение бета-структуры в их молекулах. Полученные результаты могут быть использованы для оптимизации систем бактериального дисплея 10Fn3, а также других гетерологичных пассажирских доменов.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2022
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2022.-N 9.-С.1223-1231. Библ. 38 назв.
Просмотров: 12