Редактирование генома с использованием SAM-системы для получения изогенных клеточных линий с оверэкспрессией белка CD5 человека

Аннотация:

Проведение экспериментов in vitro и in vivo зачастую требует создания удобного клеточного инструментария, позволяющего надежно контролировать специфичность тестируемых соединений или подходов в отношении белка-мишени. Идеальным решением таких задач является использование клеточных линий, отличающихся по наличию или отсутствию единственного интересующего целевого белка. Клонирование и эффективная доставка кассет, кодирующих такие белки, особенно крупные, как правило, сопряжены с рядом трудностей, равно как и нокаутирование кодирующих их генов. В работе представлен универсальный подход для преодоления данной проблемы с использованием SAM (Synergistic Activation Меdiator)-технологии, основанной на элементах системы CRISPR/Cas9, в результате применения которого было получено четыре модельных изогенных клеточных линии человека (U343, HeLa, НТ-1080 и НЕр-2) с оверэкспрессией белка CD5. Ключевые слова: изогенные клеточные линии, редактирование генома, экспрессия гена, CD5, CRISPR/Cas9, SAM.

Авторы:

Издание: Российский журнал персонализированной медицины
Год издания: 2022
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2022.-N 4.-С.56-62. Библ. 12 назв.
Просмотров: 17