Эффективность фаговых литических ферментов при получении бактериальных теней

Аннотация:

Бактериальные тени (БТ) представляют собой клеточные оболочки грамотрицательных бактерий без цитоплазматического содержимого, полученные путем лизиса в результате перфорации клеточной стенки, опосредованной белком Е бактериофага фХ174. Введение в конструкцию литической плазмиды в дополнение к гену белка Е бактериофага <рХ174 генов лизиса других бактериофагов, нацеленных на альтернативные молекулярные мишени, может привести к повышению эффективности лизиса, а в ряде случаев и к повышению иммуногенности препаратов. Материал и методы. Получены штаммы Escherichia coli, несущие плазмиды с различными комбинациями генов, кодирующих белок Е фага фХ1 74 с кассетами литических генов систем «холин-эндолизин» фагов Л или Л-41ЗС, обеспечивающих различную степень деструкции клеточной стенки, для последующего отбора наиболее перспективных литических конструкций. Образование бактериальных теней Е. coli и высвобождение содержимого клеток подтверждали с помощью просвечивающей электронной микроскопии. Результаты. При повышении температуры вырашивания с 28°С до 42°С наблюдали лизис культур Е. coli DH5a/pEYR'-E, DH5a/pEYR'-Y-K, DH5a/pEYR'-E-Y-K, DH5a/pEYR'-E-Sam7-R-Rz. Лизис практически не детектировали при росте культуры DH5a/pEYR'-S-R-Rz, как и у контрольного штамма DH5a/pEYR'. Результаты анализа ультратонких срезов препаратов БТ методом трансмиссионной электронной микроскопии (ТЭМ) были сопоставимы с данными по оптической плотности и результатами высевов индуцированных культур сконструированных штаммов, а также позволили оценить тонкое строение бактериальных клеток, несущих различные комбинации литических генов бактериофагов. Заключение. БТ грамотрицательных бактерий перспективны для создания высокоэффективных инактивированных вакцин-кандидатов, которые могли бы заменить имеющиеся в настоящее время бактериальные термоинактивированные и формолвакцины.

Авторы:

Издание: Молекулярная генетика ,микробиология и вирусология
Год издания: 2022
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2022.-N 3.-С.26-31. Библ. 19 назв.
Просмотров: 14