Применение высокоэффективной жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии для количественного определения местных анестетиков в плазме крови

Аннотация:

Цель исследования - разработка и валидация методики количественного определения местных анестетиков в плазме крови с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием. Объектами исследования явились лидокаин, бупивакаин и ропивакаин. В качестве внутреннего стандарта был использован мепивакаин. Количественное определение препаратов в плазме крови осуществляли с применением высокоэффективного жидкостного хроматографа Agilent Technologies 1260 Infinity II и масс-спектрометра АВ Sciex3200 QTrap MD. Использовали хроматографическую колонку Phenomenex Synergi 4 мкм Fusion-RP 50x2 мм. В качестве подвижной фазы использовали смесь деионизированной воды и ацетонитрила с добавлением 0,1% муравьиной кислоты. Выбор метода пробоподготовки был основан на полученных данных о степени извлечения аналитов и матричного эффекта. На этапе разработки сравнивали методы осаждения белков ацетонитрилом и метанолом, а также жидкостную экстракцию. В результате местные анестетики детектировали по соответствующим MRM-переходам: бупивакаин - m/z 289,1 —>140,2, ропивакаин - m/z 275,1->126,2, лидокаин - m/z 235,1->86,2, мепивакаин (внутренний стандарт) - m/z 247,1 ->98,1. Использовали следующие хроматографические параметры: подвижная фаза - 70% водный раствор ацетонитрила с добавлением 0,1% муравьиной кислоты, скорость потока 300 мкл/мин, температура хроматографической колонки 40 °C, объем вводимой пробы 10 мкл, общая продолжительность анализа 5 мин. Время удерживания бупивакаина, ропивакаина и лидокаина составило в среднем 1,1 мин. Извлечение местных анестетиков из плазмы крови осуществляли гексаном. Аналитический диапазон разработанной методики составил от 1 до 1000 нг/мл для бупивакаина, ропивакаина и лидокаина. Разработанная методика характеризуется быстротой выполнения, селективностью, воспроизводимостью, точностью. Заключение. Разработанная методика количественного определения бупивакаина, ропивакаина и лидокаина в плазме крови полностью соответствует требованиям отечественной и зарубежной нормативной документации и может быть использована для проведения терапевтического лекарственного мониторинга местных анестетиков и установления индивидуальных фармакокинетических особенностей препаратов.

Авторы:

Издание: Клиническая физиология кровообращения
Год издания: 2022
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2022.-N 2.-С.177-185. Библ. 23 назв.
Просмотров: 22