ПОЛУЧЕНИЕ РЕКОМБИНАНТНОЙ ФОРМЫ БЕЛКА ПНЕВМОЛИЗИНА STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE

Аннотация:

Получена рекомбинантная форма белка пневмолизина Streptococcus pneumoniae. С помощью программы для биоинформационного анализа VectorNTIAdvance ver. 11.0 были сконструированы праймеры для проведения ПЦР с целью дальнейшего клонирования фрагмента генома штамма№3358 S.pneumoniae серотипа 19F, содержащего нуклеотидную последовательность, кодирующую полноразмерный белок пневмолизин. Получен ПЦР-продукт с молекулярной массой, соответствующей нуклеотидной последовательности фрагмента генома 5. pneumoniae, кодирующего полноразмерный белок пневмолизин. Была сконструирована система для экспрессии рекомбинантного белка пневмолизина в бактериальной культуре Е. соli. Идентичность встроенной нуклеотидной последовательности, кодирующей синтез полноразмерного рекомбинантного белка пневмолизина, в штамм М15 Е. соli была подтверждена секвенированием. Очистку рекомбинантного белка проводили методом аффинной хроматографии с использованием Ni-сефарозы в 8 М буферном растворе мочевины. Подтверждение рекомбинантного белка проводили с помощью моноклональных антител к пневмолизину в иммуноблоттинге.

Авторы:

Издание: Бюллетень экспериментальной биологии и медицины
Год издания: 2022
Объем: 5с.
Дополнительная информация: 2022.-N 12.-С.723-727. Библ. 10 назв.
Просмотров: 12