Разработка метода получения суспензии эндотелиальных клеток роговицы человека и её последующей трансплантации в эксперименте ex vivo

Аннотация:

Цель: Разработать способ получения суспензии нативных эндотелиальных клеток роговицы человека. Материал и методы. Для получения суспензии нативных эндотелиальных клеток использовали 20 корнеосклеральных дисков, выделенных из энуклеированных глаз экспериментальных животных (свиньи), и 28 кадаверных корнеосклеральных дисков, выделенных от доноров-трупов (человека). В ходе работы для получения культуры клеток были использованы следующие способы выделения: механический, энзимный, а также предложенные в ходе эксперимента модифицированные варианты указанных способов. Результаты. Выявлено, что механический и модифицированный механический способы выделения позволяют получить более 95% эндотелиальных клеток роговицы. Применение энзимного способа дало низкие результаты, которые не превышали 15% выделенных клеток эндотелия, что объяснялось отсутствием прямого механического воздействия по отделению клеток от Десцеметовой мембраны (ДМ). Статистически достоверной разницы в группах свиных и человеческих роговиц выделения суспензии эндотелиальных клеток механическим и эн зимным способом выявлено не было. Модифицированный энзимный способ на человеческих роговицах обеспечил 100% выделение эндотелиальных клеток роговицы с ДМ. При анализе чистоты суспензии было выявлено, что механический и модифицированный механический способы выделения не исключают попадания крупных сторонних частиц. В образцах, полученных энзимным способом данные частицы отсутствовали. При сравнении модифицированных способов выделения суспензии эндотелиальных клеток было выявлено их статистически достоверное различие, в частности, более низкие показатели загрязнения сторонними частицами отмечены при модифицированном энзимном способе. Заключение. Проведенное экспериментальное исследование является первым этапом разработки эффективного и безопасного способа получения суспензии эндотелиальных клеток для их последующего культивирования или применения в клинической практике для замещения дефектов эндотелиального слоя, например у пациентов с буллезной кератопатией.

Авторы:

Издание: Офтальмохирургия
Год издания: 2022
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2022.-N 4.-С.56-64. Библ. 8 назв.
Просмотров: 13