ПРЯМОЕ СРАВНЕНИЕ ВАРИАНТОВ ДАЛЬНЕ-КРАСНЫХ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫХ БЕЛКОВ KATUSHKA С ЛЮЦИФЕРАЗНОЙ БИОЛЮМИНЕСЦЕНЦИЕЙ НА КСЕНОГРАФТНЫХ МЫШИНЫХ МОДЕЛЯХ ИЗУЧЕНИЯ ОПУХОЛЕЙ ЭПИТЕЛИАЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ

Аннотация:

Исследования в области онкологии требуют использования животных ксенографтных моделей, соответствующих принципам гуманности и рациональности. Доклинические исследования низкомолекулярных ингибиторов, противоопухолевых моноклональных антител, вакцин, клеточных препаратов, в том числе CAR-Т клеток, нуждаются в прижизненном контроле динамики роста опухоли. Широко применяемая люциферазная детекция биолюминесценции ксенографтов требует введения субстрата, однако инъекции менее гуманны, более трудоемки, дорогостоящи, стрессируют животное. Альтернативой люциферазной биолюминесценции могут быть флуоресцентные белки дальне-красного спектра, визуализация эмиссии которых в экспериментальных моделях in vivo упростит манипуляции с животными и увеличит доступность детекции. Цель. Сравнить эффективность детекции динамики роста опухолевых ксенографтов in vivo в мышиных моделях с инъекцией опухоли шейки матки, применяя доступную линейку флуоресцентных дериватов красного белка одной клады Katushka с распространенной в in vivo исследованиях люциферазой Renilla. Материалы и методы. Ксенографтные модели NSG-SGM3 мышей были получены подкожным введением модифицированных клеток линии HeLa, экспрессирующих флуоресцентные белки-репортеры Katushka, Katushka2S, TurboRFP, TurboFP650 и люциферазу Renilla. Исследование и оценку флуоресцентного и биолюминесцентного сигнала опухоли проводили на 7, 14, 21 сутки после введения ксенографта. Результаты. Спектральные характеристики и детекция эмиссии белков-репортеров Katushka и Katushka2S выделяют данные маркеры среди всей линейки исследуемых белков дальне-красного спектра. Заключение. Детекция флуоресцентного сигнала дальне-красных белков-репортеров Katushka и Katushka2S может служить полноценной альтернативой люциферазной биолюминесценции фермента Renilla в экспериментальных моделях in vivo в рамках иммунотерапевтических исследований.

Авторы:

Издание: Трансляционная Медицина
Год издания: 2022
Объем: 12с.
Дополнительная информация: 2022.-N 6.-С.59-70. Библ. 21 назв.
Просмотров: 14