ПОЛУЧЕНИЕ КЛЕТОЧНОЙ ЛИНИИ, СОДЕРЖАЩЕЙ ХИМЕРНЫЙ ГЕН ETV6-NTRK3. ПОИСК МУТАЦИЙ ТИРОЗИНКИНАЗНОГО ХИМЕРНОГО ДОМЕНА, ВЫЗЫВАЮЩИХ УСТОЙЧИВОСТЬ К ДЕЙСТВИЮ ЛАРОТРЕКТИНИБА

Аннотация:

Разработка, регистрация и дальнейшее применение таргетных препаратов (энтректиниб и ларотректиниб) для лечения опухолей, возникающих в результате онкогенной стимуляции химерными белками рецепторов нейротрофинов (TRK), обусловили повышенный интерес к механизмам формирования резистентности опухолевых клеток к ингибиторам TRK в процессе лечения. На основе фибробластов человека (hFF) создана клеточная линия, несущая химерный ген ETV6-NTRK3 (HFF-EN). Уровень транскрипции химерного гена ETV6-NTRK3 в клетках HFF-EN был сопоставим с уровнем транскрипции гена АСТВ, экспрессия белка ETV6-NTRKA подтверждена иммуноблоттингом. Сравнение кривых доза—эффект фибробластов и клеток HFF-EN показало ~38-кратное увеличение чувствительности последних к ларотректинибу. Для получения модели развития устойчивости к ларотректинибу при NTRK-зависимом раке с использованием пассажей линии при постепенно увеличивающейся концентрации ларо-тректиниба были получены шесть резистентных клонов. В пяти клонах обнаружили мутацию p.G623E c.1868G>A, в одном клоне, демонстрирующем значительно меньшую резистентность, была обнаружена мутация p.R582W с. 1744С>Т, ранее не описанная как мутация резистентности. Полученные данные могут быть использованы в дальнейших исследованиях для более полного понимания механизмов формирования резистентности к ингибиторам TRK и в разработке новых препаратов.Продуктами генов NTRK(Neurotrophin Tropomyosin Receptor Kinase) являются тирозинкиназные рецепторы к нейротрофинам (TRK). Семейство TRK(TRKA, ген NTRK1', TRKB, ген NTRK2 и TRKC, ген NTRK3) получило своё название в честь онкогена, выделенного из опухоли толстого кишечника группой Mariano Barbacid в 1982 г. В норме TRK участвуют в развитии и функционировании нервных тканей: дифференцировке, пролиферации, формировании синапсов, аксонов и дендритов, мембранном транспорте ; основная функция TRK-рецепторов осуществляется путём связывания со специфическими лигандами — нейротрофинами. В результате внутри- или межхромосомной перестройки гены NTRK могут образовывать химерные гены, содержащие на З'-конце последовательность киназного домена NTRK, присоединённую к 5’-последовательности гена-партнёра. Продукт такого гена—химерный белок—обладает свойством лиганднезависимой активации киназного домена.

Авторы:

Издание: Клеточные технологии в биологии и медицине
Год издания: 2023
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2023.-N 1.-С.20-26. Библ. 17 назв.
Просмотров: 18