КЛОНИРОВАНИЕ И ЭКСПРЕССИЯ luх-ОПЕРОНА Photorhabdus luminescens, ШТАММ Zm1: НУКЛЕОТИДНАЯ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ ГЕНОВ luxAB И ОСНОВНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ЛЮЦИФЕРАЗЫ

Аннотация:

Проведено клонирование фрагмента хромосомы бактерий Photorhabdus luminescens Zml, содержащего lux-onepон, в мультикопийном векторе pUC18. Гибридный клон, содержащий плазмиду рХеп7 с EcoRI-фрагментом размером около 7 тпн, характеризуется высоким уровнем биолюминесценции. В результате субклонирования и рестрикционного анализа EcoRI-фрагмента определено расположение генов luxCDABE относительно сайтов рестрикции. Определена нуклеотидная последовательность фрагмента ДНК, содержащего гены luxA и luxB, кодирующие альфа- и бета-субъединицы люциферазы. Сравнение с нуклеотидными последовательностями luxAB генов штаммов Ph. luminescens Hm и Hw дало 94.5 и 89.7% гомологии соответственно. В спейсере между генами luxD и luxA обнаружена последовательность ERIC (enterobacterial repetitive intergenic consensus), состоящая из 126 пн и характерная для штаммов Hw. Предполагается, что lux-оперон Zml возник в результате рекомбинации штаммов Hm и Hw. Показана высокая термостабильность люциферазы Ph. luminescens: активность люциферазы уменьшается в десять раз при 44°С за 30 мин, в то время как люциферазы морских бактерий Vibrio fischeri и Vibrio harveyi инактивируются на порядок при 44°С в течение 1 и 6 мин соответственно. Предполагается использование lux-генов Ph. luminescens для генно-инженерных и биотехнологических работ.

Авторы:

Издание: Генетика
Год издания: 2000
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2000.-N 3.-С.322-330
Просмотров: 50