NK-КЛЕТКИ человека интернализуют РЕКОМБИНАНТНЫЙ ОСНОВНОЙ СТРЕСС-ИНДУЦИРУЕМЫЙ БЕЛОК HSP70

Аннотация:

Одной из основных функций белков теплового шока семейства 70 кДа (HSP70) является защита внутриклеточных протеинов от повреждающих воздействий стрессирующих факторов различной природы. Наряду с этим HSP7070 играют важную роль в жизнедеятельности клеток и в нормальных физиологических условиях, выполняя вспомогательные, так называемые шаперонные функции. Эти упомянутые функции реализуются во внутриклеточном пространстве; однако в некоторых случаях эти белки также обнаруживаются на клеточной поверхности и во внеклеточной среде. Причины и механизмы такой транслокации на клеточную поверхность и секреции HSP70 во внеклеточное пространство еще недостаточно изучены. Вместе с тем показано, что такая необычная внеклеточная локализация HSP70 активирует клетки иммунной системы. Поверхностные HSP70 и их внеклеточный пул стимулируют цитотоксическую активность, в том числе NK-клеток. Однако прямых экспериментальных доказательств возможности интернализации белков HSP70 NK-клетками еще не было продемонстрировано. В данной работе представлены результаты взаимодействия внеклеточного пула HSP70 с NK-клетками периферической крови здоровых доноров. Результаты исследования подтвердили возможность интернализации экзогенных молекул HSP70 NK-клетками. С этой целью нами были получены флуоресцентно меченые молекулы рекомбинантного стресс-индуцируемого HSP70 человека. О связывании HSP70 с флуорохромом свидетельствовала флуоресценция полученного конъюгата при воздействии освещения с длиной волны 488 нм. Данные электрофореза свидетельствовали об отсутствии деградации белка в процессе мечения, чистоте и стабильности модифицированного белка. Для оценки взаимодействия HSP70 с NK-клетками флуоресцентно меченый HSP70 добавляли к культуре NK-клеток in vitro, выделенных методом магнитной сепарации из мононуклеарной фракции периферической крови, и анализировали с помощью конфокальной микроскопии. Этот анализ показал, что живые NK-клетки интернализуют внеклеточные HSP70, которые локализуются как в лизосомах, так и в фагосомах. Наши эксперименты впервые иллюстрируют процесс проникновения внеклеточных HSP70 в эти клетки. Полученные результаты позволяют предположить, что активация NK-клеток под действием экзогенного HSP70 может быть связана в том числе и с интернализацией этих белков.

Авторы:

Издание: Медицинская иммунология
Год издания: 2023
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2023.-N 3.-С.447-452. Библ. 15 назв.
Просмотров: 14