Экзогенная экспрессия протеинфосфатазы DUSP9 снижает скорость миграции клеток карциномы почки

Аннотация:

DUSP9/MKP-4 принадлежит к семейству биспецифических протеинфосфатаз, негативно регулирующих MAP-киназы (ERK, р38 и JNK). Исследования последнего десятилетия указывают на то, что DUSP9 может быть одной из мишеней для терапевтического воздействия на метастатическую форму карциномы почки. О значительном снижении уровня мРНК DUSP9 в клинических образцах КП, по сравнению с нормальной тканью, впервые сообщили Ю.В. Чебуркин и соавт. в 2002 г. и в последующие годы многие другие исследовательские группы. Мы показали, что подавление экспрессии мРНК DUSP9 происходит уже на ранних стадиях карциномы почки, а экспрессия гена DUSP9 может регулироваться на эпигенетическом уровне гендерно-зависимым образом. Целью данной работы было изучение влияния экзогенной экспрессии гена DUSP9 на пролиферацию и миграцию клеток карциномы почки человека. В работе использовалась DUSР9-негативная линия карциномы почки человека ACHN. Трансфекцию клеток проводили сконструированным нами DUSP9экспрессирующим вектором. Эффективность трансфекции оценивали методами иммунофлуоресценции и вестерн-блота, количество жизнеспособных клеток МТТ-тестом, скорость миграции клеток скрэтч-тестом. Внеклеточные везикулы из кондиционной среды выделяли, используя SubX™ технологию, и характеризовали методом анализа траекторий наночастиц и вестери-блотом. В результате эффективность трансфекции варьировала от 70 % до 90 %. Количество жизнеспособных клеток, экспрессирующих DUSP9, и клеток, трансфицированных вектором без вставки, различалась незначительно 48 ч после трансфекции. Экспрессия DUSP9 статистически значимо уменьшала скорость миграции клеток по сравнению с контролем. Белок DUSP9 обнаруживался в экзосомной фракции бессывороточной кондиционной среды от клеток, трансфицированных DUSP9экспрессирующим вектором. Выводы. Мы показали, что экзогенная экспрессия DUSP9 замедляет миграцию клеток карциномы почки. Результат указывает на то, что одной из возможных ролей DUSP9 в канцерогенезе почки может быть регулирование процесса метастазирования.

Авторы:

Издание: Вопросы онкологии
Год издания: 2023
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2023.-N 3.-С.429-436. Библ. 23 назв.
Просмотров: 16