СКРИНИНГ СПЕЦИФИЧЕСКИХ ПЕПТИДНЫХ ЛИГАНДОВ ВНЕКЛЕТОЧНОГО ДОМЕНА М3-М4 а1-СУБЪЕДИНИЦЫ Na+/K+ - HACOCA И АНАЛИЗ АКТИВНОСТИ ВЫЯВЛЕННОГО ОЛИГОПОЛИПЕПТИДА P-А IN VITRO И IN VIVO

Аннотация:

При изучении гипертонии особое внимание уделяют взаимодействию уабаина (OUA) и Na+/К+-насоса. Проведён поиск олигопептида, способного противодействовать ингибиторному действию эндогенного OUA на Na+/К+-насос, и изучены его эффекты на клеточном и организменном уровнях. Поиск олигопептидов, специфически связывающихся с внеклеточным доменом М3-М4 а1-субъединицы Na+/K+-нacoca (участок связывания с OUA), провели с использованием библиотеки Phage Random 12 Peptide Library. В качестве целевого фрагмента выбрали синтетическую последовательность аминокислот ILEYTWLEAGGGS внеклеточного домена МЗ-М4 а1-субъединицы Na+/K+-Hacoca. Положительные фаговые клоны из библиотеки идентифицировали с помощью сэндвич-ИФА. ДНК экстрагировали и секвенировали для синтеза лигандов Na+/К+-насоса — олигопептидов P-А, P-В и Р-С. Также изучили действие олигопептида с наибольшим подавляющим эффектом в отношении OUA на пролиферацию и апоптоз эндотелиальных клеток сосудов EA.hy926 и систолическое АД у спонтанно гипертензивных крыс SHR. Влияние олигопептида P-А на пролиферацию (стимуляция OUA в физиологических концентрациях) и апоптоз клеток EA.hy926 (стимуляция OUA в высоких концентрациях) оценивали с помощью МТТ-теста и проточной цитометрии соответственно. Внутривенное введение P-А снизило систолическое АД у крыс SHR. Олигопептид P-А конкурентным образом препятствовал ингибирующему действию OUA на Na+/К+-насос, а также пролиферации и апоптозу клеток EA.hy926, стимулированных OUA. Полученные результаты являются ещё одним шагом в исследовании новых антигипертензивных препаратов.

Авторы:

Издание: Клеточные технологии в биологии и медицине
Год издания: 2023
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2023.-N 3.-С.192-200. Библ. 15 назв.
Просмотров: 14