ПУПОВИННАЯ КРОВЬ КАК ПЕРСПЕКТИВНЫЙ ИСТОЧНИК NK-КЛETOK ДЛЯ ИММУНОТЕРАПИИ

Аннотация:

В настоящее время большое количество исследований по генной модификации NKклеток пуповинной крови (UCB-NK) проводится как на клиническом, так и доклиническом уровне. Иммунотерапия на основе UCB-NK-клеток обладает большим терапевтическим потенциалом для использования в противоопухолевой терапии. Однако, несмотря на известные преимущества перед PB-NK-клетками, такие как высокая концентрация в пуповинной крови, низкий процент передачи вируса от донора, а также возможность сохранения фенотипа после криоконсервации, UCB-NK-клетки преимущественно характеризуют в научной литературе как незрелые и низкофункциональные NK-клетки. В данной работе были изучены фенотипические характеристики UCB-NK-клеток и возможность стимуляционной компенсации сниженной функциональной активности UCB-NK-клеток. Проведенные исследования выявили, что фенотипически UCB-NK-клетки можно охарактеризовать как малодифференцированные и слабоактивированные клетки, экспрессирующие высокий уровень ингибирующего рецептора NKG2A, низкий уровень активирующего рецептора NKG2C и молекулы активации HLA-DR, что соответствовало литературным данным. Для стимуляции свежевыделенных UCB-NK-клеток было выбрано два вида стимулов: 1) 100 ед IL-2; 2) комбинация 100 ед IL-2 и фидерных клеток К-562, экспрессирующих мембраносвязанный IL-21 (K562-mbIL21). Было показано, что при стимуляции UCB-NK-клеток в течение 7 дней комбинацией IL-2 и K562-mbIL21 уровень дегрануляции (LAMP-1) и пролиферативная активность этих клеток была выше, чем у параллельно культивируемых в тех же условиях Ex vivo PB-NK-клеток, при этом стимул в виде IL-2 и K562-mbIL21 оказался более перспективным способом получения большого количества пролиферативно активных UCBNK-клеток, по сравнению со стимуляцией только IL-2. Поскольку генетическая модификация NKклеток является перспективным направлением улучшения противоопухолевых свойств NK-клеток, для дальнейшего изучения полученных UCB-NK-клеток была проведена процедура ретровирусной трансдукции. UCB-NK-клетки, стимулированные комбинацией IL-2 и K562-mbIL21, трансдуцировались на 8-й день культивирования. В данной работе применялась направленная оверэкспрессия адапторной молекулы DAP12, участвующей в сигналинге активирующих NK-клеточных рецепторов. PB-NK-клетки и UCB-NK-клетки трансдуцировали параллельно, в одинаковых экспериментальных условиях при равном объеме вирусных частиц. В результате было выявлено, что эффективность трансдукции вирусными частицами, несущими ген адапторной молекулы DAP12, в более чем 4 раза выше для UCB-NK-клеток по сравнению с PB-NK-клетками. Таким образом UCB-NK-клетки представляются перспективным инструментом для дальнейших исследований в области иммунотерапии рака.

Авторы:

Издание: Медицинская иммунология
Год издания: 2023
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2023.-N 5.-С.1259-1264. Библ. 15 назв.
Просмотров: 16