Полный текст
Евгения Викторовна Мокрецова1, Геннадий Степанович Томилка2, Юрий Григорьевич Ковальский3, Наталья Юрьевна Якушева4, Александр Юрьевич Щупак5
Некоторые показатели цитокинового статуса крови больных клещевым риккетсиозом, обусловленным Rickettsiaе heilongjiangensis, в Хабаровском крае
1-5Дальневосточный государственный медицинский университет, Хабаровск, Россия
1bremer68@mail.ru, https://orcid.org/0000-0001-9492-2660
2genntom@mail.fesmu.ru, https://orcid.org/0000-0002-8785-2147
3kovalyura@mail.ru, https://orcid.org/0000-0001-7433-6285
4whiteout@mail.ru, https://orcid.org/0000-0003-1561-5465
5schupakalex@mail.ru, https://orcid.org/0000-0001-6255-7638
Аннотация:
Проведено проспективное исследование некоторых показателей цитокинового статуса крови больных клещевым риккетсиозом, обусловленным R. heilongjiangensis, без сопутствующих хронических заболеваний в стадии декомпенсации. Установлено, что в разгаре заболевания у больных клещевым риккетсиозом, обусловленным R. heilongjiangensis, происходило статистически значимое повышение показателей IL-6, IL-8, TNF относительно группы сравнения, указывающее на интенсивность деструктивно-воспалительных и восстановительных процессов. В динамике заболевания, а именно в периоде ранней реконвалесценции, исследуемые показатели цитокинового статуса крови больных клещевым риккетсиозом, обусловленным R. heilongjiangensis, оставались высокими, достоверно отличаясь от таковых в разгаре заболевания. Для цитирования: Некоторые показатели цитокинового статуса крови больных клещевым риккетсиозом, обусловленным Rickettsiaе heilongjiangensis, в Хабаровском крае / Е.В. Мокрецов, Г.С. Томилка, Ю.Г. Ковальский и др. // Дальневосточный медицинский журнал. - 2023. - № 3. - С. 18-21. http://dx.doi.org/10.35177/1994-5191-2023-3-3.
Ключевые слова:
клещевые трансмиссивные инфекции, риккетсиоз, цитокиновый статус
Evgeniya V. Mokretsova1, Gennady S. Tomilka2, Yuri G. Kovalskiy3, Natalia Yu. Yakusheva4, Alexander Yu. Schupak5
Some indicators of the blood cytokine status in patients with tick-borne rickettsiosis caused by Rickettsiaе heilongjiangensis identified in the Khabarovsk territory
1-5Far Eastern State Medical University, Khabarovsk, Russian Federation
1bremer68@mail.ru, https://orcid.org/0000-0001-9492-2660
2genntom@mail.fesmu.ru, https://orcid.org/0000-0002-8785-2147
3kovalyura@mail.ru, https://orcid.org/0000-0001-7433-6285
4whiteout@mail.ru, https://orcid.org/0000-0003-1561-5465
5schupakalex@mail.ru, https://orcid.org/0000-0001-6255-7638
Abstract:
A study of some indicators of the blood cytokine status in patients with tick-borne rickettsiosis caused by r. heilongjiangensis, without concomitant chronic diseases in the decompensation stage, was carried out. It was revealed that at the peak of the disease in patients with tick-borne rickettsiosis caused by r. heilongjiangensis, there was a statistically significant increase in IL-6, IL-8, TNF relative to the comparison group, indicating the intensity of destructive-inflammatory and regenerative processes. In the dynamics of the disease, namely in the period of early convalescence, the studied indicators of the blood cytokine status in patients with tick-borne rickettsiosis caused by r. heilongjiangensis remained high, being significantly different from those at the peak of the disease. For citation: Some indicators of the blood cytokine status in patients with tick-borne rickettsiosis caused by rickettsiaе heilongjiangensis identified in the Khabarovsk territory / E.V. Mokretsova, G.S. Tomilka, Yu.G. Kovalskiy, et al. // Far Eastern medical journal. - 2023. - № 3. - P. 18-21. http://dx.doi.org/10.35177/1994-5191-2023-3-3.
Key words:
tick-borne vector-borne infections, rickettsiosis, cytokine status
Введение
Бактериальные инфекции, передающиеся клещами, представляют серьёзную проблему для здравоохранения Дальнего Востока. Клещевой риккетсиоз (КР) в этой группе неизменно занимает лидирующую позицию: на территории Хабаровского края в течение последних лет наблюдается значительный рост заболеваемости этой инфекцией (на 75 % с 2015 по 2019 год) [1]. КР относится к группе клещевых пятнистых лихорадок и является распространённой клещевой трансмиссивной инфекцией, эндемичной для средних широт Евразийского континента, однако на разных географических территориях его этиология различна [3]. В частности, на территории Хабаровского края возбудителем КР является R. heilongjiangensis, на что мы обращали внимание в предыдущих публикациях [2]. Изучение отдельных клинико-патогенетических аспектов клещевого риккетсиоза, распространённого на территории Хабаровского края, по-прежнему актуально, наряду с необходимостью совершенствования патогенетической терапии этой инфекции.
Гиперпродукция цитокинов является определяющим моментом в развитии воспалительных реакций при многих инфекционных заболеваниях. В частности, установлена решающая роль соотношения продукции провоспалительных и противовоспалительных цитокинов, отражающего интенсивность деструктивно-воспалительных и восстановительных процессов в патогенезе инфекционных заболеваний [4, 6]. В доступной нам литературе отсутствуют сведения об исследовании цитокинового статуса у больных клещевым риккетсиозом, обусловленным R. heilongjiangensis. Вместе с тем, изучение показателей цитокинов в крови, их значение в развитии клинических проявлений острой стадии клещевого риккетсиоза, способствует выявлению дополнительных критериев оценки степени тяжести и прогноза заболевания.
Предметом настоящего исследования явилась оценка некоторых показателей цитокинового статуса крови больных клещевым риккетсиозом, обусловленным R. heilongjiangensis, с целью углублённого понимания отдельных сторон патогенеза и, в дальнейшем, разработки критериев оценки степени выраженности оксидативного стресса, отражающего тяжесть заболевания.
Согласно критериям, предложенным А.С. Симбирцевым в 2004 г. [5], характеризующим биологические и биохимические свойства цитокинов, было решено исследовать некоторые показатели цитокинового статуса:
- интерлейкин 4 (IL-4), продуцируемый Т-лимфоцитами, стимулирующий ранние этапы дифференцировки В-лимфоцитов, синтез Ig E;
- интерлейкин 6 (IL-6), активирующий продукцию белков острой фазы воспаления и способствующий регуляции воспаления;
- интерлейкин 8 (IL-8), усиливающий генерацию активных форм кислорода, а также играющий роль активатора нейтрофилов;
- фактор некроза опухолей (TNF), являющийся одним из основных провоспалительных цитокинов с антимикробной активностью, активирующий продукцию свободных радикалов.
Материалы и методы
После получения письменного информированного согласия пациента в соответствии с международными этическими требованиями (Хельсинская декларация Всемирной медицинской ассоциации), предъявляемыми к медицинским манипуляциям с участием человека, проведено проспективное рандомизированное клинико-лабораторное обследование 27 пациентов (16 мужчин и 11 женщин) с клещевым риккетсиозом, обусловленным R. heilongjiangensis, получавших стационарную специализированную медико-санитарную помощь в инфекционном отделении КГБУЗ "Городская клиническая больница" имени профессора А.М. Войно-Ясенецкого министерства здравоохранения Хабаровского края. Медиана и персентиль возраста составили 62 (52÷69) года.
Группу сравнения составили 30 человек, сопоставимых по возрасту (p<0,05), у которых кровь исследовалась однократно. Соотношение женщин и мужчин было 12:18, соответственно.
Диагноз установлен на основании клинико-эпидемиологических данных и лабораторно, с использованием наборов "РеалБест ДНК Rickettsiae species", "РеалБест ДНК Rickettsiae sibirica/Rickettsiae heilongjiangensis" (АО "Вектор-Бест", Новосибирск) для обнаружения ДНК rickettsiae heilongjiangensis в сыворотке крови.
Первая проба крови взята в период разгара (на 4-5 дни болезни), вторая - в стадии ранней реконвалесценции (через 8-10 дней от момента госпитализации).
На базе Центральной научно-исследовательской лаборатории ФГБОУ ВО ДВГМУ Минздрава России оценивали количественное содержание сывороточных провоспалительных (IL-6, IL-8, TNF) и противовоспалительных (IL-4) цитокинов в динамике болезни. При определении уровня цитокинов в анализируемых образцах использовался набор реагентов для определения концентрации интерлейкинов в сыворотке крови (АО "Вектор-Бест", Россия) методом твердофазного иммуноферментного анализа с чувствительностью пикограмм на миллилитр (пг/мл).
Математическая обработка части полученных цифровых данных проводилась непараметрическими методами на персональном компьютере (процессор Intel® Core ® i3-7300, операционная система Windows 10 с использованием программы Microsoft Office Excel 2007), включая определение средних величин (M), ошибки средней (m), медианы и персентильного интервала (Me (25 %; 75 %)). Для сравнения значений численных характеристик групп использовался критерий Манна - Уитни. Значения считались статистически достоверными при уровне значимости равным 1 % или 5 %.
Результаты и обсуждение
Результаты исследованных параметров цитокинового статуса представлены в таблице.
Таблица - Некоторые показатели цитокинового статуса (пг/мл) в сыворотке крови у пациентов с клещевым риккетсиозом, обусловленным R. heilongjiangensis, в динамике заболевания (М±m)
Показатели Группа сравнения (n=30) В разгаре заболевания (n=27) В период ранней реконвалесценции (n=27)
IL-4 0,1996±0,0128 0,2367±0,0456, P1<0,05 0,2107±0,0499, P2>0,05, P3>0,05
IL-6 1,0919±0,0942 61,7222±6,0923, P1<0,01 8,8396±1,6332, P2<0,01, P3<0,01
IL-8 4,5523±0,3135 24,0222±1,8659, P1<0,01 37,8593±5,8938, P2<0,01, P3>0,05
TNF 1,0783±0,0692 10,3940±1,1040, P1<0,01 3,9930±0,1659, P2<0,01, P3<0,01
Примечание. P1 - достоверность различий между показателями в разгаре заболевания и группой сравнения;
P2 - достоверность различий показателей в периоде ранней реконвалесценции по отношению к группе сравнения;
P3 - достоверность различий показателей в разгаре заболевания и периоде ранней реконвалесценции.
У больных клещевым риккетсиозом, обусловленным R. heilongjiangensis, в разгаре заболевания наблюдалось достоверное повышение (эмпирическое значение p<0,01 в зоне значимости) в сыворотке крови всех исследуемых провоспалительных цитокинов (маркеров Th1 типа иммунного ответа), что определяет выраженность интоксикационно-воспалительного синдрома.
В динамике отмечалось статистически значимое снижение уровня IL-6 и TNF (в 7 и 2,6 раза соответственно) относительно разгара заболевания, но с сохранением различия относительно группы сравнения (p<0,01). Синергическое влияние этих цитокинов способствует синтезу белков острой фазы. Сверхпродукция фактора некроза опухоли приводит к активации свободных радикалов и сигналу к апоптозу [7].
Уровень эндогенного хемоаттрактанта IL-8, напротив, достоверно повышался на всем протяжении заболевания, возрастая в период ранней реконвалесценции относительно разгара до полутора раз (p<0,01). Являясь индуктором генерации активных форм кислорода, данный провоспалительный медиатор может рассматриваться как один из активаторов оксидативного стресса.
Концентрация противовоспалительного агента (IL-4) в период ранней реконвалесценции достоверно не отличалась от группы сравнения, что может указывать на минимальную стимуляцию пролиферации иммунокомпетентных клеток (Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов и натуральных киллеров), синтеза иммуноглобулина (маркеров Th2 типа иммунного ответа).
Таким образом, повышение активности исследуемых цитокинов у больных клещевым риккетсиозом, обусловленным R. heilongjiangensis, свидетельствует об их роли в формировании воспалительных реакций при КР. Продолжающийся рост уровня IL-8 в периоде ранней реконвалесценции может указывать на то, что клиническое выздоровление не отражает патогенетическое завершение инфекции.
Выводы
1. Впервые проведенное проспективное исследование цитокинового статуса в сыворотке крови больных среднетяжёлой формой клещевого риккетсиоза в Хабаровском крае выявило в разгаре заболевания активизацию провоспалительных цитокинов.
2. Показатели исследуемых провоспалительных цитокинов в сыворотке крови больных среднетяжёлой формой клещевого риккетсиоза в периоде ранней реконвалесценции оставались высокими, статистически значимо отличаясь от таковых в группе сравнения.
3. Уровень эндогенных хемоаттрактантов в сыворотке крови больных среднетяжёлой формой клещевого риккетсиоза достоверно повышался как в период разгара заболевания, так и в период ранней реконвалесценции.
4. Исследование цитокинового статуса в динамике болезни отражают степень выраженности ранней воспалительной реакции, развитие иммунного ответа и могут использоваться для определения степени тяжести и прогнозирования исходов клещевого риккетсиоза.
5. Полученные результаты являются основанием для дальнейших исследований, направленных на установление связи активации цитокинов с выраженностью оксидативного стресса, отражающего степень тяжести клещевого риккетсиоза.
Список источников
1. Захарычева Т.А., Семенов В.А., Бондаренко Т.Е., Этенко Д.А., Троценко О.Е. и др. Современный клещевой энцефалит и другие клещевые инфекционные заболевания в Хабаровском крае и Кемеровской области (Кузбассе) // Дальневосточный медицинский журнал. - 2022. - № 3. - С. 6-12.
2. Карань Л.С., Мокрецова Е.В., Щучинова Л.Д., Томилка Г.С., Малеев В.В. и др. Сравнительный анализ эффективности выявления ДНК риккетсий группы клещевых пятнистых лихорадок в разных видах клинического материала и возможность видовой идентификации возбудителя методом ПЦР // Инфекционные болезни. - 2015. - Т. 13, № 2. - С. 25-29.
3. Рудаков Н.В., Шпынов С.Н., Транквилевский Д.В., Савельев Д.А. и др. Особенности эпидемической ситуации по сибирскому клещевому тифу и другим клещевым риккетсиозам в Российской федерации, прогноз на 2019 г. // Проблемы особо опасных инфекций. - 2019. - № 1. - С. 89-97.
4. Сташкевич Д.С., Филиппова Ю.Ю., Бурмистрова А.Л. Актуальные вопросы иммунологии: система цитокинов, биологическое значение, генетический полиморфизм, методы определения: методическое пособие // Челябинск: Цицеро. - 2016. - 82 с.
5. Симбирцев А.С. Цитокины: классификация и биологические функции // Цитокины и воспаление. - 2004. - Т. 3, № 2. - С. 16-22.
6. Симбирцев А.С. Цитокины в патогенезе инфекционных и неинфекционных заболеваний человека // Медицинский академический журнал. - 2013. - Т. 1, № 3. - С. 18-41.
7. Ильинских Е.Н., Замятина Е.В., Галактионова О.И. Продукция цитокинов, активация окислительных процессов и индукция цитогенетических нарушений у больных иксодовым клещевым боррелиозом // Медицинская иммунология. - 2015. - Т. 17, № 5. - С. 164.
Проведено проспективное исследование некоторых показателей цитокинового статуса крови больных клещевым риккетсиозом, обусловленным R. heilongjiangensis, без сопутствующих хронических заболеваний в стадии декомпенсации. Установлено, что в разгаре заболевания у больных клещевым риккетсиозом, обусловленным R. heilongjiangensis, происходило статистически значимое повышение показателей IL-6, IL-8, TNF относительно группы сравнения, указывающее на интенсивность деструктивно-воспалительных и восстановительных процессов. В динамике заболевания, а именно в периоде ранней реконвалесценции, исследуемые показатели цитокинового статуса крови больных клещевым риккетсиозом, обусловленным R. heilongjiangensis, оставались высокими, достоверно отличаясь от таковых в разгаре заболевания
Добавить в коллекцию