КОНЪЮГАЦИОННАЯ СИСТЕМА ДОСТАВКИ ВЕКТОРОВ ДЛЯ МОЛЕКУЛЯРНОГО КЛОНИРОВАНИЯ В КЛЕТКИ БАКТЕРИЙ РОДА BACILLUS

Аннотация:

Разработана система доставки векторов для молекулярного клонирования в клетки бактерий рода Bacillus. Особенность созданной системы заключается в использовании плазмиды pBS72, обеспечивающей конъюгационный перенос полученного условно летального вектора pKSlmob в клетки исследуемых бактерий. Способность вектора pKSlmob реплицироваться в клетках Escherichia coli и В. subtilis при пониженной температуре (30°С), наличие двух полилинкеров вокруг гена канамицин-резистентности позволяет клонировать в его состав фрагменты целевых генов с использованием традиционных генно-инженерных подходов. Инактивация гена rоk в плазмиде pBS72 позволила с высокой эффективностью трансформировать содержащий ее штамм сконструированным вектором pKSlmob. Скрещивание донорного штамма В. subtilis 168, содержащего конъюгативную pBS72 и мобилизуемую pKSlmob плазмиды, со штаммом-реципиентом рода Bacillus позволило ввести в него плазмиду pKS lmob. Показана возможность использования созданной системы для инактивации гена codY бактерий Bacillus licheniformis.

Авторы:

Издание: Прикладная биохимия и микробиология
Год издания: 2023
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2023.-N 6.-С.581-588. Библ. 17 назв.
Просмотров: 12