СИНТЕЗ ФЛУОРЕСЦЕНТНО-МЕЧЕНЫХ НУКЛЕОТИДОВ ДЛЯ МАРКИРОВАНИЯ ПРОДУКТОВ ИЗОТЕРМИЧЕСКОЙ АМПЛИФИКАЦИИ

Аннотация:

Осуществлен синтез флуоресцентно-меченых нуклеотидов, содержащих цвиттерионный индодикарбоцианиновый краситель, присоединенный через транс-алкеновый спейсер в положении С5 пиримидинового основания, и проверена их субстратная эффективность в условиях рекомбиназной полимеразной амплификации (RPA). В результате RPA образовались полноразмерные целевые продукты фрагмента гена ebpS возбудителя бактериальной пневмонии (Staphylococcus aureus) с высокой плотностью встраивания флуоресцентной метки. В последние годы в практике клинических лабораторных исследований инфекционных заболеваний все больше внимания уделяется молекулярно-генетическим методам анализа. Важным этапом развития микроанализа нуклеиновых кислот стала разработка систем, включающих все этапы проведения анализа в одном устройстве ("лаборатория на чипе"): выделение анализируемого генетического материала из образца и его амплификация методом ПЦР с одновременным флуоресцентным маркированием, гибридизационный анализ и цифровая регистрация полученных результатов, автоматически, без контакта с окружающей средой. Развитие технологии "лаборатория на чипе" привело к появлению новых методов анализа, основанных на изотермической амплификации нуклеиновых кислот. Амплификация нуклеиновых кислот при одной оптимальной температуре значительно упрощает реализацию методов амплификации в медицинских диагностических приборах и аналитическом оборудовании. При оптимально подобранных условиях изотермическая амплификация обеспечивает сопоставимую или даже более высокую чувствительность и специфичность по сравнению с традиционной ПЦР. Цель данной работы — синтез субстратов для ферментов изотермической амплификации в виде флуоресцентно-меченых пиримидиновых нуклеотидов, содержащих транс-алкеновый спейсер в положении С5.

Авторы:

Издание: Биоорганическая химия
Год издания: 2023
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2023.-N 6.-С.649-656. Библ. 17 назв.
Просмотров: 18