Применение специфичных к белку A29L моноклональных антител a-A29L_MPoxV для диагностики оспы обезьян

Аннотация:

Введение. Распространение с 2022 г. заболевания, вызываемого вирусом оспы обезьян (BOO), показало актуальность разработки мер противодействия. Развитие современных методов клинической лабораторной диагностики BOO способствует этому. Иммуноферментный анализ (ИФА) является доступной и чувствительной платформой для разработки средств диагностики. Выявление антигенов BOO тест-системами ИФА на основе моноклональных антител (MKA) перспективно благодаря оперативности анализа и наличию минимальных требований к пробоподготовке. Материал и методы. Разработаны и депонированы два штамма-продуцента рекомбинантных белков на основе экспрессирующей системы Escherichia coli. Белок AgPOX для иммунизации мышей содержит уникальные антигенные последовательности BOO. Белок Trх+A29 для отбора продуцента MKA включает оригинальную аминокислотную последовательность A29L. B ИФА проверяли отсутствие кроссовера антител к белку Trx и нативным препаратам вируса натуральной оспы и вируса осповакцины. B результате гибридизации спленоцитов иммунизированных мышей получены продуценты МКА. Результаты. 15 гибридом-продуцентов MKA отобраны по результатам ИФА с тремя специфичными и тремя неспецифичными антигенами BOO. Для депонирования по критерию продуктивности отобраны три гибридомы. Проверена возможность выявления MKA от них различных концентраций нативного антигена BOO, определена чувствительность метода. MKA a-A29L_MPoxV трех гибридом выявили нативный антиген BOO в концентрации 102 БОЕ/мл. Вероятно, метод еще более чувствителен при подборе условий анализа. Заключение. Ha основе меченых MKA a-A29L_MPoxV возможна разработка чувствительной и специфичной иммунодиагностики BOO методом непрямого двухстадийного ИФА.

Авторы:

Издание: Молекулярная генетика ,микробиология и вирусология
Год издания: 2023
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2023.-N 4.-С.31-37. Библ. 19 назв.
Просмотров: 8