НОВЫЙ ПРОМОТОР pAraDH2 ДЛЯ МЕТАБОЛИЧЕСКОЙ ИНЖЕНЕРИИ ДРОЖЖЕЙ Yarrowia lipolytica

Аннотация:

Проведена оценка способности дрожжей Yarrowia lipolytica утилизировать ряд многоатомных спиртов в качестве единственных источников углерода. Для исследования эффективности промотора нативного гена Y. lipolytica AraDH2, кодирующего фермент D-маннит/D-арабитол-дегидрогеназу, при культивировании рекомбинантных дрожжей на минимальных средах с разными источниками углерода промоторная область гена AraDH2 была транскрипционно слита с геном зеленого флуоресцентного белка hrGFP и трансформирована в Y. lipolytica. Используя описанный промотор, был сконструирован продуцирующий p-каротин штамм дрожжей Y. lipolytica, несущий гены Mucor circi-nelloides CarRP и СагВ, кодирующие бифункциональный фермент фитоен синтазу/ликопин В-циклазу (carRP) и фитоен дегидрогеназу (сагВ), а также ген GGPPSs7 Synechococcus sp., кодирующий ге-ранилгеранилпирофосфат синтазу. Введение в геном дрожжей нуклеотидной последовательности, кодирующей слитые carRP и GGPPSs7, под регуляцией промотора pAraDH2, и гена СагВ под контролем промотора pTEF привело к получению трансформанта, способного продуцировать 66.3, 121.2 и 148.9 мг/л В-каротина на 5 сутки культивирования в тестовых пробирках на среде с глицерином, сахарозой и глюкозой, соответственно. Полученные результаты свидетельствуют о высоком потенциале промотора pAraDH2 в сфере генетического конструирования.

Авторы:

Издание: Биотехнология
Год издания: 2023
Объем: 12с.
Дополнительная информация: 2023.-N 1.-С.27-38. Библ. 16 назв.
Просмотров: 15