In vitro ИССЛЕДОВАНИЕ МАТРИКСОВ НА ОСНОВЕ АДЕНОВИРУСНЫХ КОНСТРУКЦИЙ С ГЕНОМ ВМР2, ПОЛИЛАКТИДНЫХ ГРАНУЛ, КОЛЛАГЕНА И ФИБРИНА

Аннотация:

С использованием сканирующей электронной и флуоресцентной микроскопии, имуноферментного анализа, спектрофотометрических методов и ПЦР в реальном времени оценены свойства ген-активированных матриксов на основе полилактидных гранул, коллагена и фибрина. Установлено, что эти матриксы не оказывают токсического действия на культуру мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток и поддерживают клеточную адгезию. Аденовирусные конструкции с геном ВМР2 в составе матриксов обладают высокой трансдуцирующей способностью. В присутствии матриксов наблюдается эффективная остеогенная дифференцировка культур мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток. Полученные матриксы могут быть использованы при разработке новых методов лечения дефектов костной ткани. В настоящее время для восполнения костных дефектов в регенеративной медицине используют неактивированные остеопластические материалы. Они решают задачу заполнения дефекта, но не обладают способностью стимулировать неоостеогенез. В целях повышения эффективности лечения создаются остеопластические материалы на основе биорезорбируемых матриц-носителей, активированных остеоиндуктивными факторами роста или векторами с генами этих факторов. Использование генетических конструкций более предпочтительно, поскольку обеспечивает продолжительную локализованную экспрессию остеогенных белков в резидентных клетках в зоне костного дефекта. В качестве целевого гена для регенерации костной ткани перспективно использование гена костного морфогенетического белка 2 (ВМР2), продукт которого является остеоиндуктором. Наиболее предпочтительным способом доставки генов в клетки является применение аденовирусных векторов, которые обеспечивают высокую эффективность трансдукции как делящихся, так и неделящихся клеток, и сводят к минимуму риск возникновения инсерционного мутагенеза. В качестве матрикса для доставки вирусных конструкций в область костного дефекта может быть использована композиция из биорезорбируемых биосовместимых материалов — пористых полилактидных гранул (PLA-гранул), коллагена (Col) и фибринового сгустка на основе обогащенной тромбоцитами плазмы (Platelet-rich plasma, PRP). PLA-гранулы служат депо биоактивных компонентов, а коллаген и PRP позволяют сохранять форму материала в течение нескольких недель и являются источниками факторов, участвующих в регенерации костной ткани. Цель работы: оценка свойств ген-активированных матриксов на основе PLA-гранул, коллагена и PRP, импрегнированных аденовирусными конструкциями с геном ВМР2 in vitro.

Авторы:

Издание: Биотехнология
Год издания: 2023
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2023.-N 2.-С.72-78. Библ. 8 назв.
Просмотров: 14