РАЗЛИЧИЯ В ФОРБОЛЗАВИСИМОМ ФОСФОРИЛИРОВАНИИ РЕГУЛЯТОРНЫХ БЕЛКОВ И СОКРАЩЕНИИ ФАЗНЫХ И ТОНИЧЕСКИХ ГЛАДКИХ МЫШЦ

Аннотация:

Гладкие мышцы разделяются на медленные тонические и быстро сокращающиеся фазные. В обоих случаях Са2+ является ключевым медиатором сократительного ответа. Однако наличие тонической компоненты при сокращении сфинктеров и артериальных сосудов и ее отсутствие в фазной мускулатуре висцеральных органов являются параметрами, определяющими их различие. Мы обнаружили, что форбол PDBu вызывает тоническое напряжение мышцы сонной артерии курицы, но не вызывает сокращения фазной мышцы мускульного желудка курицы. Целью настоящей работы был поиск тканеспецифичных различий в PDBu-зависимом фосфорилировании ключевых белков-регуляторов сокращения кальдесмона, киназы легких цепей миозина (КЛЦМ) - и родственного ей белка телокина (KRP). Были выявлены два коррелятивных различия. 1. PDBu повышал уровень фосфорилирования КЛЦМ в тонической ткани, но не влиял на фосфорилирование КЛЦМ в фазной. Результаты картирования фосфопептидов предполагают участие митогенактивируемой протеинкиназы (МАР-киназы) в фосфорилировании КЛЦМ in siru. 2. PDBu индуцирует фосфорилирование кальдесмона по участкам МАР-киназы в обоих типах гладких мышц, однако это фосфорилирование не оказывало существенного влияния на функциональную активность кальдесмона in vitro. Впервые обнаружено, что в фазной ткани PDBu стимулирует также транзиторное фосфорилирование кальдесмона пока не установленной киназой, отличной от протеинкиназы С, Са2+/кальмодулинзависимой протеинкиназы и казеинкиназы СК2. 3. Не обнаружено существенных различий в кинетике PDBu-зависимого фосфорилирования KRP в тонической и фазной мускулатуре. В то же время KRP является основным фосфобелком in vivo, фосфоркпируемым по нескольким остаткам в пределах N-концевой области белка. Выявлены протеинкиназы, способные фосфорилировать эти остатки in vitro. Предполагается, что PDBu стимулирует фосфорилирование KRP МАР-киназой по участку, который гомологичен фосфорилируемому в КЛЦМ. 4. р44erk2 и р38 МАР-киназы обнаружены в фазной и тонической мускулатуре. Установлена их активация при действии PDBu на культивируемые гладкомышечные клетки аорты и исследовано их участие в фосфорилировании КЛЦМ и низкомолекулярной изоформы кальдесмона in vivo.

Авторы:

Издание: Цитология
Год издания: 2000
Объем: 14с.
Дополнительная информация: 2000.-N 4.-С.378-391
Просмотров: 27