РИБОСОМНЫЙ ПРОМОТОР pRPL25 ДРОЖЖЕЙ Yarrowia Iipolytica КАК ПЕРСПЕКТИВНЫЙ ОБЪЕКТ ДЛЯ МЕТАБОЛИЧЕСКОЙ ИНЖЕНЕРИИ ШТАММОВ-ПРОДУЦЕНТОВ

Аннотация:

B метаболической инженерии дрожжевых штаммов-продуцентов промоторы относятся к ключевым элементам. Благодаря высокому уровню активности промотор гена RPL25, кодирующего белок L25 большой субчастицы рибосомы Yarrowia Hpolytica, — это перспективный объект исследования и оптимизации. Для исследования структуры этого промотора нами сконструирована библиотека рандомизированных последовательностей с шагом в 100 нуклеотидов. Используя в качестве белка-репортера зеленый флуоресцентный белок, мы оценили активность полученных промоторных последовательностей. Показано, что среди исследованных производных промотора pRPL25 минимальная функциональная длина составляет 199 п.н., а оптимальная — 497 п.н. Также выявлено существенное снижение уровня экспрессии производных промотора pRPL25 при уменьшении длины от 497 до 400 п.н., на основании чего мы предполагаем, что между 400 и 500 нуклеотидами промотора гена АРL 25находится активирующая последовательность (upstream activating sequence, UAS). Промотор pRPL25 и его производные можно использовать в биоинженерии метаболических путей с требуемым уровнем экспрессии генов. Сконструированные на их основе штаммы могут быть более эффективными продуцентами целевых молекул, чем классические системы экспрессии, например на основе Saccharo-myces cerevisiae. Ключевые слова: Yarrowia Hpolytica, метаболическая инженерия, рибосомный промотор, синтетический промотор, флуоресценция

Авторы:

Издание: Биотехнология
Год издания: 2023
Объем: 9с.
Дополнительная информация: 2023.-N 5.-С.52-60. Библ. 23 назв.
Просмотров: 16