НОВЫЕ ИНСТРУМЕНТЫ ДЛЯ СТАБИЛЬНОЙ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ В БАКТЕРИЯХ Rhodococcus

Аннотация:

На основе ранее использовавшейся плазмиды pRY16 сконструирована новая бирепликонная Escherichia coli— Rhodococcus плазмида pRY3-Rho-MCS, малокопийная в Rhodococcus и многокопийная в Е. coli, стабильно наследуемая в родококках. Новая плазмида способна к конъюгативному переносу из Е. coli в R. rhodochrous и R. qingshengii. Полученные штаммы R. rhodochrous и R. qingshengii с новой плазмидой стабильно сверхпродуцировали зеленый флуоресцентный белок turboGFP под контролем коринебактериального промотора Ptuf. Методом проточной цитофлуориметрии оценена эффективность экспрессии целевого гена в сконструированных штаммах и возможность использования этой технологии в поиске высокоактивных промоторов для экспрессии целевых генов в Rhodococcus. Количественно охарактеризована нестабильность наследования в R. rhodochrous исходной плазмиды pRY16, которая потенциально пригодна для разработки методов редактирования генома Rhodococcus spp., основанных на CRISPR/Cas. Сделан вывод, что полученные инструменты: плазмида pRY3-Rho-MCS и промотор Ptuf — обладают значительным потенциалом для применения в биотехнологии, в том числе для создания биокатализаторов, а также продуцентов бактериальных белков, трудно синтезируемых в Е. coli и других модельных микроорганизмах.

Авторы:

Издание: Биотехнология
Год издания: 2023
Объем: 11с.
Дополнительная информация: 2023.-N 6.-С.41-51. Библ. 20 назв.
Просмотров: 15