ВЛИЯНИЕ СТРЕПТОКОККОВОЙ АРГИНИНДЕИМИНАЗЫ НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ CD4+ И CD8+ ПОПУЛЯЦИЙ Т-ЛИМФОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА

Аннотация:

Метаболизм аргинина играет важную роль в регуляции функций клеток иммунной системы у млекопитающих. Патогенные микробы используют механизм истощения аргинина для подавления иммунного ответа при инфекции. Аргининдеиминаза — микробный аргинин-гидролизующий фермент, необходимый для выживания при низком pH в очаге инфекции или внутри фаголизосом, а также в условиях низкого содержания глюкозы. Влияние бактериальной аргининдеиминазы на функции клеток адаптивного иммунного ответа остается слабо изученным. Цель исследования состояла в изучении влияния стрептококковой аргининдеиминазы на пролиферацию и аутофагию CD4+ и CD8+ популяций Т-лимфоцитов периферической крови человека. Действие фермента на клетки изучали с использованием супернатантов разрушенных ультразвуком Streptococcus pyogenes М49-16 и его изогенного мутанта с инактивированным геном arcA (Streptococcus pyogenes М49-16delarcA). Исследование проводили с использованием крови здоровых доноров. Фракцию мононуклеарных лейкоцитов выделяли путем центрифугирования на градиенте плотности Фиколла. Для оценки пролиферации использовали метод, основанный на окрашивании внутриклеточных белков прижизненным флуоресцентным красителем carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE). Исследование уровня аутофагии в клетках проводили с использованием флуоресцентного красителя Lysotracker Green DND-26. Для анализа пролиферации и аутофагии Т-хелперов (CD3+CD4+) и цитотоксических Т-лимфоцитов (CD3+CD4 ) клеточные суспензии, окрашивали антителами против CD4, CD45RA, и CD3. Долю клеток в состоянии некроза определяли путем их окрашивания флуоресцентным ДНК-связывающим красителем DAPI. Нормальность распределения оценивали тестом Шапиро—Уилка. Данные были проанализированы с использованием критерия Краскела—Уоллиса с последующим применением критерия Манна—Уитни для попарных сравнений и выражены в виде медианы и межквартильных диапазонов (Q0,25-Q0,75). Сравнение эффектов супернатантов разрушенных стрептококков исходного и мутантного штаммов, которые отличались по экспрессии одного гена аргининдеиминазы, показало, что бактериальный фермент не оказывал влияния на функции неактивированных лимфоцитов. Однако стрептококковая аргининдеиминаза полностью подавляла стимулированную anti-CD2/CD3/CD28 антителами пролиферацию CD4+ и СD8+Т-лимфоцитов. Эти эффекты сопровождались снижением в клетках уровня аутофагии. В то же время аргининдеиминаза не обладала цитотоксическими эффектами в отношении лимфоцитов. Введение супрафизиологических концентраций L-аргинина исследуемые восстанавливало клеточные функции. Различий между исследуемыми параметрами CD4+ и CD8+ популяций Т-лимфоцитов выявлено не было. Полученные данные показывают, что антипролиферативное действие аргининдеиминазы может быть связано со способностью фермента ингибировать аутофагию и доказывают способность бактериального фермента подавлять адаптивные иммунные реакции организма-хозяина.

Авторы:

Издание: Медицинская иммунология
Год издания: 2024
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2024.-N 3.-С.503-512. Библ. 31 назв.
Просмотров: 8