Влияние трансфузии и гипоксии на клетки модели нейроваскулярной единицы in vitro

Аннотация:

Частота развития послеоперационного делирия при коррекции врожденных пороков сердца (ВПС) достигает 57%. В поиске путей профилактики церебрального повреждения при коррекции ВПС у детей важным является вопрос — что опаснее: гипоксия при отказе от трансфузии или действие повышенного системного воспалительного ответа (СВО) при ее применении. Исследование действия гипоксии и СВО на клетки нейроваскулярной единицы (НВЕ) in vitro способствует решению данного вопроса. Цель исследования — сравнить влияние гипоксии различной выраженности и системного воспалительного ответа на функциональную активность клеток нейроваскулярной единицы. Сформировали in vitro модель НВЕ, состоящую из нейронов, астроцитов и эндотелиоцитов. Влияние гипоксии на НВЕ оценивали в контрольной (К) и 4 исследуемых (Г1-4) группах. Группы сформировали по содержанию О2 в среде: К — стандартные условия культивирования: N2 — 75%, О2 — 20%, СО2 — 5%; Г1: N2 — 99%, О2 — 1%; Г2: N2 — 98%, О2 — 2%; ГЗ: N2 — 97%, О2 — 3%; Г4: N2 — 96%, О2 — 4%. Значимость различий составила 0,0125. Влияние содержания интерлейкина-6 (ИЛ-6) на НВЕ определяли при культивировании клеток с добавлением сыворотки крови пациентов детского возраста с минимальным, либо максимальным напряжением СВО. Оценку провели в контрольной и 2 исследуемых группах: «Контроль» — интактная модель НВЕ; группы «Минимум» и «Максимум» — образцы с минимальным либо максимальным содержанием ИЛ-6 в культуре соответственно. Значимость различий составила 0,017. Инкубацию клеток проводили в режиме нормотермии в течение 30 мин. Затем оценивали функциональную активность клеток НВЕ методом измерения трансэндотелиального сопротивления (ТЭС) в течение 24 ч и измерения проницаемости для красителя Lucifer Yellow (LY) через 60 и 90 мин от начала эксперимента. В результате после инкубации в условиях гипоксии изменения ТЭС наступили во всех исследуемых группах клеток. Однако, только в группе с 1% содержанием кислорода в среде они были статистически значимы. Снижения ТЭС в данной группе наблюдали через 2, 4 и 24 ч. Проницаемость клеток для красителя LY изменилась через 60 и 90 мин также только в условиях их инкубации в среде с 1% кислородом. При культивировании клеток НВЕ с сывороткой крови пациентов выявили минимальные значения ТЭС через 4 ч и их дальнейшее повышение через 24 ч для обеих исследуемых групп НВЕ. Проницаемость клеток для LY значительно изменилась к 60-й мин как в группе с минимальным, так и с максимальным содержанием ИЛ-6 в среде. При этом к 90-й мин различий этого показателя в исследуемых группах и в контрольной группе уже не наблюдали. Заключение. Напряженный СВО оказал более выраженное, но кратковременное действие на модель НВЕ, чем гипоксия. Гипоксия нарушила функциональную активность НВЕ только при концентрации кислорода в среде — 1%.

Авторы:

Издание: Общая реаниматология
Год издания: 2024
Объем: 6с.
Дополнительная информация: 2024.-N 1.-С.37-42. Библ. 12 назв.
Просмотров: 4