СРАВНЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ РАЗЛИЧНЫХ ПРОМОТОРОВ ДЛЯ ПРОДУКЦИИ СЕКРЕТИРУЕМОЙ бета-МАННАНАЗЫ Bacillus subtilis КЛЕТКАМИ МЕТИЛОТРОФНЫХ ДРОЖЖЕЙ Ogataea haglerorum

Аннотация:

Сильные и строго регулируемые промоторы являются мощным инструментом для создания высокопродуктивных штаммов-продуцентов рекомбинантных белков. Чтобы расширить потенциал системы экспрессии Ogataea haglerorum, природные метанол-индуцируемые промоторы генов OhMOX и OhFMD и конститутивный промотор гена OhGAP были изучены в сравнении с промотором гена ОрМОХ из дрожжей О. polymorpha. В качестве репортерного использовали ген MANS, кодирующий рекомбинантную бета-маннаназу. При культивировании трансформантов О. haglerorum, содержащих ген MANS под контролем промоторов pOhMOX, pOhFMD, pOhGAP из О. haglerorum и рОрМОХ из О. polymorpha, активность бета-маннаназы в супернатанте составила 170, 93, 89 и 100% соответственно. По результатам ПЦР в реальном времени в клетках дрожжей О. haglerorum промотор pOhMOX обеспечивал более высокий уровень экспрессии гена MANS, чем промотор рОрМОХ из дрожжей О. polymorpha. Полученные сведения о силе промоторов из дрожжей О. haglerorum могут быть полезны при конструировании продуцентов рекомбинантных белков и оптимизации путей метаболизма в дрожжах О. haglerorum.

Авторы:

Издание: Прикладная биохимия и микробиология
Год издания: 2024
Объем: 10с.
Дополнительная информация: 2024.-N 1.-С.29-38. Библ. 33 назв.
Просмотров: 4