Получение рекомбинантного белка VP1 норовируса и его антигенные и иммуногенные свойства

Аннотация:

Значимость норовирусов в инфекционной патологии человека и опасность возникновения крупных эпидемических вспышек в организованных коллективах обосновывают необходимость разработки средств специфической профилактики инфекции. Цель работы — получение рекомбинантного белка VP1 норовируса и анализ его иммуногенных и антигенных свойств. Материалы и методы. Проведены компьютерный анализ нуклеотидных и аминокислотных последовательностей, молекулярное клонирование, полимеразная цепная реакция, электрофорез нуклеиновых кислот в агарозном геле и белков в полиакриламидном геле, аффинная хроматография, иммуноферментный анализ. Результаты. Создана генетическая конструкция, кодирующая рекомбинантный VP1 норовируса генотипа GII с кодонами, оптимизированными для высокоэффективной экспрессии в Escherichia coli. Генетической конструкцией трансформирован штамм Е. coli Rosetta 2 (DE3). Осуществлена экспрессия VP1 в клетках Е. coli, оптимизированы условия для его продукции, очистки и ренатурации. Получен очищенный растворимый рекомбинантный белок VP1, формирующий вирусоподобные частицы диаметром 30-50 нм. Иммунизация белком мышей BALB/c вызывала образование антител с титром более 1:1000. При оценке антигенных свойств показано, что в крови волонтёров присутствуют антитела классов IgG, IgM, IgA, взаимодействующие с рекомбинантным VP1. Суммарная частота обнаружения антител составила 47,4%. Заключение. Результаты обосновывают возможность использования рекомбинантного VP1 для создания отечественной вакцины для профилактики норовирусной инфекции.

Авторы:

Издание: Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии
Год издания: 2024
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2024.-N 5.-С.661-667. Библ. 15 назв.
Просмотров: 1