КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ ФАГОЦИТОЗА B ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ C ПРИМЕНЕНИЕМ ДВОЙНОГО ОКРАШИВАНИЯ И ВИЗУАЛИЗАЦИИ

Аннотация:

Фагоцитоз - важнейшая функция врождённого иммунитета человека и животных. Снижение способности к фагоцитозу связано со многими заболеваниями и старением иммунной системы. Определение фагоцитарной динамики клеток требует количественной оценки бактерий внутри и снаружи фагоцита. Хотя проточная цитометрия является наиболее распространённым методом оценки фагоцитоза, её использование не предполагает визуализации и прямой количественной оценки пространственной локализации бактерий. B данном исследовании применяли методы проточной цитометрии (сортировки) и конфокальной микроскопии в сочетании с «двухцветной» маркировкой бактерий Escherichia coli, которые использовали как объект фагоцитоза. Для обеспечения высокой производительности количественного и пространственного распознавания двухцветных E. coli, ассоциированных с фагоцитами, также применяли проточную цитометрию с визуализацией в потоке. Ha основании полученных данных было сделано предположение о важной роли удержания патогенов на поверхности миелоидных и лимфоидных клеток без последующей интернализации. Разработанный метод бактериальной конъюгации существенно повысил точность количественной и пространственной оценки фагоцитоза и может быть рекомендован в качестве вспомогательного подхода при использовании проточных цитометров с визуализацией для анализа фагоцитоза в цельной крови. КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: фагоцитоз, E. coli, проточная цитометрия, конфокальная микроскопия, Amnis, лейкоциты человека.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2024
Объем: 12с.
Дополнительная информация: 2024.-N 5.-С.908-919. Библ. 22 назв.
Просмотров: 1