ВЛИЯНИЕ ДЕЗОКСИХОЛАТА НАТРИЯ И ТВИН-20 НА АКТИВНОСТЬ И СВОЙСТВА Na+/К+-АТФазы В СМЕШАННОЙ МЕМБРАННОЙ ФРАКЦИИ КОРЫ БОЛЬШИХ ПОЛУШАРИЙ ГОЛОВНОГО МОЗГА КРЫС

Аннотация:

Настоящая работа расширяет представления об активности уабаин-чувствительных (а2 и аЗ) и уабаин-резистентной (а1) изоформ Na+/К+-АТФазы в смешанной мембранной фракции коры больших полушарий головного мозга крыс в присутствии различных детергентов. Цель исследования - определить активность уабаин-чувствительных (а2 и аЗ) и уабаин-резистентной (а1) изоформ Na+/K+-АТФазы с помощью изменения концентрации ионов Мд+2 в инкубационной среде и при использовании детергентов дезоксихолата натрия и Твин-20. Материал и методы. Для определения активности Na+/К+-АТФазы использовали методику А. Казеннова и соавт. Реакцию запускали добавлением инкубированного с детергентами гомогената коры больших полушарий, образцы инкубировали в течение 30 мин на водяной бане при температуре 37°C. Активность уабаин-чувствительных изоформ определяли при добавлении в инкубационную смесь 200 мкмоль уабаина, а активность уабаин-резистентных изоформ - как разницу между общей активностью Na+/К+-АТФазы и активностью уабаин-чувствительных изоформ. Активность АТФаз выявляли по приросту неорганического фосфата, как разницу между общей АТФазной активностью, активностью магниевой АТФазы, в реакции с молибдатом аммония и хлоридом олова в присутствии аскорбиновой кислоты в качестве восстановителя. Результаты. При оптимальных концентрациях детергентов Dox-Na (1,25 мг/мл), Твин-20 (6,5 мг/мл), как для уабаин-чувсвительных, так и для уабаин-резистентных изоформ Na+/К+-АТФазы, характерна нормальная динамика активности от концентрации ионов Мg2+. Следовательно, использование детергентов в заданных концентрациях не изменяет способности ферментов к конформационным перестройкам в ходе реакционного цикла. Установлено, что оба использованных детергента позволяют выявить существенный процент латентной активности уабаин-чувствительных (а2 и а3) и уабаин-резистентной (а1) изоформ Na+/K+-АТФазы в смешанной мебранной фракции коры больших полушарий головного мозга крыс. Выводы. Исследование Мg2+-зависимых свойств выявило сходный характер кривых зависимости активности фермента от концентрации Мg2+ в инкубационной среде для всех исследованных изоформ Na+/K+-АТФазы.

Авторы:

Издание: Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии
Год издания: 2024
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2024.-N 10.-С.52-59. Библ. 17 назв.
Просмотров: 5