ЭФФЕКТ ИНТЕНСИФИКАЦИИ ЦИКЛА ТРИКАРБОНОВЫХ КИСЛОТ НА БИОСИНТЕЗ АДИПИНОВОЙ КИСЛОТЫ ШТАММАМИ Escherichia coli ПО ОБРАЩЕННОМУ В-ОКИСЛЕНИЮ ЖИРНЫХ КИСЛОТ

Аннотация:

С использованием в качестве базового ранее сконструированного адипат-секретирующего штамма Escherichia coli MG 1655 lacIq, AackA-pta, AрохВ, AldhA, AadhE, Pl-SDфl0-atoB, Рtrс-idеаl-4-SDф10-fаdB, AfadE, Pl-SDфl0-tesB, AyciA, Ptrc.ideal-4-SDф10-fabI, Pl-SDф10-paaJ, AaceBAK, AglcB получены штаммы-производные, способные к повышенному синтезу целевого соединения из глюкозы по обращенному пути B-окисления жирных кислот. Такой эффект достигнут при интенсификации в клетках цикла трикарбоновых кислот. Прекращение множественных обращений цикла за счет инактивации в штамме сукцинатдегидрогеназы не оказывало выраженного влияния на формирование рекомбинантом адипиновой кислоты. При интенсификации цикла за счет усиления анаплеротического формирования щавелево-уксусной кислоты из фосфоенолпирувата, в результате повышения экспрессии нативного гена ррс, синтез адипиновой кислоты возрастал в 1.2 раза до -390 мкМ. Обеспечение возможности формирования щавелево-уксусной кислоты из пировиноградной, при введении в штамм активности гетерологичной пируваткарбоксилазы Bacillus subtilis, приводило к интенсификации цикла в 1.5 раз и сопровождалось ростом секреции адипиновой кислоты до -496 мкМ. Последующая инактивация в штамме генов sdhAB повышала секрецию целевого соединения лишь незначительно и титр адипиновой кислоты достигал -520 мкМ. Полученные данные указывали на прямую зависимость эффективности синтеза адипиновой кислоты сконструированными рекомбинантами от степени интенсификации в них цикла трикарбоновых кислот.

Авторы:

Издание: Прикладная биохимия и микробиология
Год издания: 2024
Объем: 8с.
Дополнительная информация: 2024.-N 3.-С.246-253. Библ. 27 назв.
Просмотров: 1