РЕКОМБИНАНТНАЯ ХИМОТРИПСИНОПОДОБНАЯ ПЕПТИДАЗА Tenebrio molitor С НЕКАНОНИЧЕСКИМ СУБСТРАТ-СВЯЗЫВАЮЩИМ САЙТОМ

Аннотация:

Охарактеризована щелочная химотрипсиноподобная сериновая пептидаза большого мучного хрущака Tenebrio molitor с неканоническим субстрат-связывающим субсайтом, которая может быть использована в качестве добавки в различные биопрепараты. Фермент был получен в форме рекомбинантного препарата, очистка была проведена с использованием аффинной хроматографии на Ni2+-NTA агарозе. Было определено, что константы специфичности (кcat/Кm) для субстратов химотрипсина Glp-AAF-pNA, Suc-AAPF-pNA и Ac-Y-pNA составляли 7.0, 4.2 и 0.9 (мкМ-мин)-1 соответственно. Оптимум активности наблюдался при pH 9.0. Фермент был стабилен при щелочных pH, в присутствии БСА также и при кислых pH. Пептидаза ингибировалась синтетическими ингибиторами, такими как PMSF, ТРСК, химостатин, в то время как ЭДТА, Е-64, пепстатин не влияли на активность фермента. Очищенный фермент продемонстрировал высокую стабильность в течение 2.5 ч в присутствии БСА. Короткий жизненный цикл насекомого и секреция множества пептидаз в средней кишке с высокой каталитической активностью и стабильностью могут сделать Т. molitor отличным альтернативным источником промышленно важных ферментов для использования в качестве добавок в различных биопрепаратах (например, пятновыводителях, моющих средствах и т.п.).

Авторы:

Издание: Прикладная биохимия и микробиология
Год издания: 2024
Объем: 12с.
Дополнительная информация: 2024.-N 3.-С.254-265. Библ. 39 назв.
Просмотров: 0