Дальневосточный государственный медицинский университет Поиск | Личный кабинет | Авторизация
Поиск статьи по названию
Поиск книги по названию
Каталог рубрик
в коллекциюДобавить в коллекцию

Изменение STR-профиля клеток в процессе получения стабильной клеточной линии


Аннотация:

Потеря гетерозиготности, утрата Y-хромосомы и другие типы генетических изменений характерны для опухолевых линий. Стандартные методы для выявления таких изменений трудоемки, времязатратны и дороги. Рутинный лабораторный анализ подлинности и отсутствия внутривидовой контаминации клеточных линий методом профилирования коротких тандемных повторов (short tandem repeats - STR) позволяет контролировать некоторые генетические изменения, которые клетки претерпевают в процессе жизненного цикла. Цель исследования - контроль подлинности и генетической изменчивости клеток в ходе получения стабильной клеточной линии. Профилирование проводили для первичных клеточных культур, для образцов ксено-графтов met Lap nude, met Has nude и met Pet nude, а также в ходе культивирования клеток на 8,10, 20-м пассажах культуры mel Lap, на 10-м, 20-м пассажах культуры met Kas и на 5,10, 20,49-м пассажах культуры mel Pet, а также после выведения из заморозки архивированных образцов. В результате для культуры mel Lap к 8-му пассажу наблюдали потерю гетерозиготности в локусе SE33, а далее генетический профиль сохранялся стабильным. Клетки mel Kas к 10-му пассажу потеряли гетерозиготность по 2 локусам SE33 и D6S1043, а также в локусе CSF1P0 на 0-м пассаже наблюдали амплификацию аллелей 11, 12,13. Впоследствии культура сохраняла устойчивый STR-профиль. Клеточная культура mel Pet к 5-му пассажу потеряла гетерозиготность практически по всем исследуемым локусам, но далее ее STR-профиль сохранялся неизменным на протяжении 49 пассажей и в материале ксенографта. Заключение. Метод STR-профилирования позволяет не только контролировать генетическую стабильность в клеточной линии и отсутствие внутривидовой контаминации при культивировании, но и, будучи быстрым и дешевым, может использоваться в качестве дополнительного первичного теста на наличие значительных генетических изменений в клетках.

Авторы:

Мальченкова А.А.
Кособокова Е.Н.

Издание: Российский биотерапевтический журнал
Год издания: 2024
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2024.-N 4.-С.61-67. Библ. 10 назв.
Просмотров: 2

Рубрики
Ключевые слова
Ваш уровень доступа: Посетитель (IP-адрес: 10.1.104.102)
Яндекс.Метрика