РАСШИРЕНИЕ СФЕРЫ ПРИМЕНЕНИЯ КЛИНИЧЕСКИХ БИОХИМИЧЕСКИХ НАБОРОВ РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ МЕТАБОЛИТОВ И АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТОВ И ОПТИМИЗАЦИЯ ПРОТОКОЛОВ ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ

Аннотация:

Основными потребителями коммерческих наборов реагентов для исследования метаболитов и ферментов являются клинические лаборатории. Поэтому протоколы их использования и расчета показателей в основном ориентированы на анализ крови и мочи. Однако необходимость определения концентрации метаболитов и активности ферментов регулярно возникает и при решении других задач. Цель работы - на примере оценки концентрации глюкозы и активности амилазы плазмы гемолимфы брюхоногого моллюска Achatina fulica продемонстрировать способы оптимизации протоколов использования некоторых клинических наборов реагентов для определения концентрации метаболитов и активности ферментов, а также возможность расширения сферы их применения. Материал и методы. Объектом исследования являлась плазма гемолимфы брюхоногого моллюска A. fulica, в которой определяли концентрацию глюкозы и активность амилазы с помощью клинических биохимических наборов реагентов фирмы Spinreact (Испания). Приведены стандартный и оптимизированный протоколы определения концентрации глюкозы. Оптимизированный протокол определения активности амилазы описан ранее. Результаты. Ахатина часто используется в качестве удобного модельного объекта в экспериментальных и практических разработках разной направленности. Знание диагностически значимых биохимических показателей плазмы гемолимфы моллюсков позволяет проводить мониторинг «состояния здоровья» животных при их культивировании в лабораториях и при практическом использовании. В отличие от исходного протокола определения концентрации глюкозы, выполнены полноценные калибровочные эксперименты, при этом время анализа образца сокращено до одной минуты. Предложенные оптимизированные протоколы использования наборов реагентов протестированы при определении концентрации глюкозы и активности амилазы в плазме гемолимфы ахатины (п=16). Значения составили 0,42±0,07 мМ и 27,8±0,6 МЕ/л соответственно. Выводы. На примере оценки концентрации глюкозы и активности амилазы плазмы гемолимфы брюхоногого моллюска Achatina fulica продемонстрирована эффективность предложенных способов оптимизации протоколов использования некоторых клинических наборов реагентов, пригодных для определения концентрации таких метаболитов, как глюкоза и лактат, а также для анализа кинетики разных ферментов при проведении прямых измерений их активности. Выполненная оптимизация позволила расширить сферу применения используемых в медицине биохимических наборов реагентов, а также существенно сократить время анализов.

Авторы:

Издание: Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии
Год издания: 2024
Объем: 7с.
Дополнительная информация: 2024.-N 12.-С.47-53. Библ. 15 назв.
Просмотров: 3