ВЛИЯНИЕ РНК-СВЯЗЫВАЮЩЕГО БЕЛКА Sam68 НА АКТИВНОСТЬ ПОЛИ(АDР-РИБОЗА)-ПОЛИМЕРАЗЫ 1

Аннотация:

Принимая во внимание участие РНК-связывающих белков в регуляции активности поли(АDР-рибоза)-полимеразы 1 (PARP1), ключевого фактора репарации ДНК, было проведено исследование влияния внутренне неупорядоченного белка Sam68 на каталитическую активность этого фермента. Для проведения исследования была получена плазмидная конструкция, содержащая в своем составе кодирующую последовательность белка Sam68, проведена оптимизация условий экспрессии Sam68 в клетках Escherichia coli, отработана методика его выделения и подобраны условия для рефолдинга этого белка из телец включения. Наши исследования в реконструированной системе показали, что Sam68 способен регулировать каталитическую активность PARP1, стимулируя ее авто-поли(АDР-рибозил)ирование. Определено сродство Sam68 к поврежденной ДНК и очищенной поли(АDР-рибозе) (PAR). На основании полученных экспериментальных данных была предложена гипотеза, объясняющая механизм стимуляции активности PARP1 белком Sam68. Согласно этой гипотезе, Sam68 взаимодействует с PAR, ковалентно присоединенной к PARP1, экранирует отрицательный заряд PAR и тем самым увеличивает время жизни активного комплекса авто-поли(АDР-рибозил)ированной PARP1 с поврежденной ДНК. Это приводит к возрастанию уровня PAR, синтезируемой этим ферментом.

Авторы:

Издание: Биохимия
Год издания: 2024
Объем: 13с.
Дополнительная информация: 2024.-N 12.-С.2045-2057. Библ. 31 назв.
Просмотров: 0