Дальневосточный государственный медицинский университет Поиск | Личный кабинет | Авторизация
Поиск статьи по названию
Поиск книги по названию
Каталог рубрик
в коллекциюДобавить в коллекцию

ПОЛНОРАЗМЕРНЫЙ РЕПЛИКОН SARS-CoV-2 С ДВУМЯ РЕПОРТЕРАМИ ДЛЯ СКРИНИНГА ИНГИБИТОРОВ РНК-ЗАВИСИМОЙ РНК-ПОЛИМЕРАЗЫ ВИРУСА


Аннотация:

В качестве безопасной клеточной системы для тестирования ингибиторов РНК-зависимой РНК-полимеразы (RdRp) SARS-CoV-2 получена генетическая конструкция, клонированная в вектор искусственной бактериальной хромосомы и представляющая собой кДНК вируса, не содержащую генов структурных белков S, Е и М, с двумя блоками репортерных генов. Первый блок, представленный люциферазой Renilla reniformis и зелёным флуоресцентным белком (Rluc-GFP), находится под контролем CMV-промотора, расположенного перед 5'-нетранслируемым регионом (5’-UTR) SARS-CoV-2. Второй блок репортерных генов представлен люциферазой светлячка Photinus pyralis и красным флуоресцентным белком (Fluc-RFP) и находится после последовательности, регулирующей транскрипцию (TRS-N). Такое расположение генов и регуляторных последовательностей позволяет оценить уровень ингибирования вирусной RdRp, поскольку первый блок репортерных генов может транскрибироваться не только вирусной RdRp, но и клеточными полимеразами, в то время как второй блок может транскрибироваться только вирусной полимеразой по механизму прерывистой транскрипции, характерной для семейства Coronaviridae. Для облегчения поиска нуклеозидных ингибиторов RdRp без создания фосфорилированных депо-форм создана клеточная линия Vero Е6_ТК, экспрессирующая тимидинкиназу вируса простого герпеса, осуществляющую первую стадию фосфорилирования нуклеозидов в клетке. Проверка способности ряда соединений ингибировать каталитическую активность RdRp SARS-CoV-2 позволила впервые обнаружить антивирусную активность у 2'-амино-2'-дез-оксиаденозина и аденозин-N1-оксида, превышающую активность используемого для лечения COVID-19 молнупиравира.

Авторы:

Королев С.П.
Шулепова А.А.
Анисенко А.Н.
Галкин С.О.
Александрова Л.А.
Ясько М.В.
Матюгина Е.С.
Новиков М.С.
Хандажинская А.Л.
Кочетков С.Н.
Готтих М.Б.

Издание: Биохимия
Год издания: 2024
Объем: 16с.
Дополнительная информация: 2024.-N 11.-С.1966-1981. Библ. 41 назв.
Просмотров: 1

Рубрики
Ключевые слова
coronaviridae
covid-19
sars-cov-2
vero
аденозин
активность
антивирусная
бактериального
безопасность
белковая
белковый
блока
вектор
вирус
вирусные
впервые
время
второй
генетическ
генов
герпес
двумя
депо
зелёного
ингибирование
ингибитор
искусственная
каталитические
качества
клетка
клеточная
клоны
ключ
конструкция
контроль
коронавирус
красные
лечение
линия
механизм
молнупиравир
нуклеозид
облегчение
осуществлявших
первая
перед
поза
поиск
пола
полимераза
полноразмерный
после
последовательностей
превышающей
прерывистый
проверка
простая
расположение
расположенные
регион
регулирующая
регуляторные
репликон
репортерный
рнк-полимераза
ряда
светлые
семейства
систем
скрининг
слова
содержащая
соединение
создание
создания
способности
стадии
структурная
тестирование
тимидинкиназа
транс
транскрипции
уровень
флуоресцентная
фосфорилирование
характерного
хромосома
человека
экспрессия
Ваш уровень доступа: Посетитель (IP-адрес: 10.1.249.213)
Яндекс.Метрика